脂多糖干预气道上皮细胞细胞因子及蛋白激酶C表达的研究

发布时间：2017-11-21 20:31

  本文关键词：脂多糖干预气道上皮细胞细胞因子及蛋白激酶C表达的研究

  更多相关文章： 脂多糖 A549细胞 蛋白激酶C 细胞因子

【摘要】：目的： 脂多糖（Lipopolysaccharide LPS）能够干预气道上皮细胞分泌多种细胞因子。目前研究较多的参与LPS干预气道上皮细胞分泌细胞因子的信号通路主要为p38丝裂原活化的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase MAPK)、c-Jun N端蛋白激酶（c-Jun N-terminal protein kinase JNK）及细胞外信号调节激酶1/2（extracellular signal-regulated kinase1/2ERK1/2）。蛋白激酶C(protein kinase CPKC)信号通路也是一种常见的细胞信号通路，有研究证明PKC参与II型肺泡上皮细胞分泌细胞因子的过程，而且能够影响血脑屏障以及肠上皮屏障功能，那么PKC是否也参与LPS干预气道上皮细胞分泌细胞因子的过程，目前尚缺乏相关研究。本实验主要检测不同时相不同浓度LPS干预气道上皮细胞后细胞因子（IL-1、IL-6、IL-8、IL-11）分泌量的变化以及PKC表达量的变化，从而探索PKC在脂多糖干预气道上皮细胞细胞因子分泌中的作用。 方法： 用培养贴壁细胞的方法培养具有气道上皮细胞特性的A549细胞株，用不同浓度的LPS干预饥饿24h后的同等数量的A549细胞，分为对照组（LPS干预浓度为0μg/ml）和实验组（LPS干预浓度为0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml、50μg/ml和100μg/ml），分别在刺激2h、4h、8h、24h、30h和48h以后收集细胞上清液及细胞总蛋白，用ELISA方法检测A549细胞IL-1、IL-6、IL-8和IL-11的分泌量，用western blotting方法检测相应的PKC的表达量。 结果： 1、不同浓度LPS干预A549细胞相同时间后细胞因子IL-1、IL-6、IL-8和IL-11的分泌量及PKC的表达量之间的差异均有统计学差异（P＜0.001）；在所有时相点，IL-1的分泌量及PKC的表达量达到最大时与空白对照组相比，差异具有统计学意义（P＜0.001）；在某些时相点，IL-6(2h、4h、24h、48h)、IL-8（2h、4h、8h、24h、30h）和IL-11（2h、8h、24h、30h、48h）的分泌量达到最大时与空白对照组相比，差异具有统计学意义（P＜0.001)，而IL-6的分泌量在8h和30h表现为下降趋势。 2、PKC蛋白的表达量和IL-11的分泌量之间具有相关性（R=0.127），，相关性分析具有统计学意义（P=0.049）。 结论： 1、LPS可以干预细胞因子IL-1、IL-6、IL-8和IL-11的分泌及PKC的表达；在某些时相点，LPS能够使气道上皮细胞细胞因子IL-1（2h、4h、8h、24h、30h、48h）、IL-8（2h、4h、8h、24h、30h）、IL-11（2h、8h、24h、30h、48h）的分泌量及PKC的表达量增加；而IL-6的分泌量和LPS干预浓度之间无明显的浓度依赖关系。 2、PKC的表达量和IL-11的分泌量呈正相关，提示LPS干预细胞因子IL-11的分泌过程可能和PKC信号通路有关。
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R363

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 李亚清;严建平;许武林;王宏;;核因子-κB和p38丝裂原活化蛋白激酶调节脂多糖诱导的气道上皮细胞白细胞介素8的表达[J];中国药理学通报;2011年02期

2 吕晶;李娜萍;;脂多糖对培养的A549细胞SP-B分泌的影响及其机制[J];临床与实验病理学杂志;2009年02期

3 葛海燕;冯健;贲素琴;倪松石;;蛋白激酶C参与脂多糖诱导肺微血管内皮细胞VEGF表达[J];南通大学学报(医学版);2008年04期

4 廖伟;钱桂生;雷撼;张方;;脂多糖诱导人气道上皮细胞hBD-2表达及核转录因子κB活性的变化[J];中国病理生理杂志;2007年01期

5 蔡颖;陈平;张广森;房祥;;AP-2α对人肺腺癌细胞 COX-2表达的作用研究(英文)[J];中国现代医学杂志;2005年24期

本文编号：1212211