巨噬细胞在结核性肉芽肿形成和发展过程中的极化

发布时间：2017-11-22 07:03

  本文关键词：巨噬细胞在结核性肉芽肿形成和发展过程中的极化

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【摘要】：目的:探讨巨噬细胞在结核性肉芽肿形成和发展过程中的极化改变，及可能存在的抗原呈递功能改变。 方法:选择PPD试验阴性、家庭成员无结核病的健康志愿者，抽取外周血，分离外周血单个核细胞（PBMC），参照相关文献和预实验方法，以结核分枝杆菌H37Rv感染PBMC构建人结核性肉芽肿体外模型，将未感染的PBMC设为对照。首先留取不同时间点（24h、3d、6d、9d和12d时）细胞培养上清液用于微环境中细胞因子水平检测（采用ELISA法检测IL-6，IL-10，IL-12，TNF-α，IFN-γ和CCL18的含量），然后采用实时荧光定量Real-Time PCR检测不同时间点趋化因子CXCL10，CXCL11，CCR7，CCL17和CCL18基因的表达。在模型构建成功后通过去除未贴壁细胞，采用胰酶消化法使结核性肉芽肿结构分散，对其进行贴壁培养4h后即获得结核性肉芽肿巨噬细胞，运用流式细胞术（FCM）检测结核性肉芽肿巨噬细胞表面标志HLA-DR，CD86，CD163（清道夫受体）和CD206（甘露糖受体）的表达。 结果:感染后第6d体外结核性肉芽肿形成。在结核性肉芽肿形成初期，感染组结核性肉芽肿巨噬细胞表面标志物CD163的表达低于未感染组(P0.05）；而感染组上清液中细胞因子TNF-α，IFN-γ，IL-12的分泌以及趋化因子CXCL10，CXCL11，CCL17，CCL18基因表达均呈现不同程度的上升趋势。结核性肉芽肿形成之后，感染组结核性肉芽肿巨噬细胞表面CD163表达高于未感染组（P0.05），HLA-DR、CD86表达明显低于未感染组(P0.01），感染组上清液中细胞因子CCL18、IL-6、IL-10分泌水平均明显升高，TNF-α，IFN-γ，IL-12分泌水平下降，趋化因子CXCL10，CXCL11，，CCR7基因表达明显下调，而CCL17，CCL18表达明显上调。 结论:结核性肉芽肿中同时存在M1和M2型巨噬细胞。在结核性肉芽肿形成初期，巨噬细胞以向M1型极化为主，而在形成后期以向M2型极化为主，并且可能存在巨噬细胞抗原呈递功能的减弱。
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R363

【参考文献】

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1 ;Metastasis-associated protein 1 induces VEGF-C and facilitates lymphangiogenesis in colorectal cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2011年09期

本文编号：1213841