不同理化因素对重组人成纤维细胞生长因子21蛋白纯度的影响

发布时间：2017-11-25 08:25

  本文关键词：不同理化因素对重组人成纤维细胞生长因子21蛋白纯度的影响

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【摘要】：目的:研究重组人成纤维细胞生长因子21(rhFGF21)在不同保存条件下的稳定性,阐明温度、pH值、缓冲溶液和反复冻融因素对rhFGF21稳定性的影响,进一步完善纯化rhFGF21的工艺。方法:rhFGF21在不同温度(-20℃、4℃和25℃)、不同pH值缓冲液(醋酸-醋酸钠缓冲液pH 4.0和pH 5.0、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液pH 5.0和pH 6.0、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液pH 6.0、pH 6.5和pH 7.0,TrisHCl缓冲液pH 7.5和pH 8.0)中及反复冻融条件下分别保存,采用高效液相色谱法(HPLC)检测rhFGF21纯度,同时观察外观性状。结果:于-20℃和4℃分别保存时,rhFGF21的各项性质在观察期内均无明显变化;25℃时,rhFGF21存放14d纯度由0d时(100.00±0.00)%下降至(15.20±0.14)%(P0.01);在pH 4.0和pH 5.0缓冲液中25℃条件下保存7d,溶液出现浑浊;在pH 5.0和pH 6.0缓冲液中25℃条件下保存7d,溶液出现浑浊;在pH 6.5和pH 8.0磷酸盐和Tris-HCl缓冲液中,溶液澄清透明;rhFGF21原液反复冻融后其纯度变化差异有统计学意义(P0.05)。结论:rhFGF21在低温和pH 6.5~8.0磷酸盐和Tris-HCl缓冲液中溶液较稳定,反复冻融处理对rhFGF21稳定性也有明显影响。
【作者单位】： 吉林医药学院公共卫生学院营养与食品卫生学教研室;吉林医药学院检验学院生物技术教研室;
【基金】：国家自然科学基金资助课题(81273421) 吉林省科技厅科技发展计划项目资助课题(20116044) 吉林省教育厅科研基金资助课题(361号)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 成纤维细胞生长因子21(fibroblast growthfactor 21,FGF21)是最新被发现的一个成纤维细胞生长因子家族的成员,属于成纤维细胞生长因子19(fibroblast growth factor 19,FGF19)亚族[1-3]。FGF21作为FGF家族的新成员,其具有调控多种内分泌功能[4]。研究[5-6]显示:FGF21的功能主要

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本文编号：1225382