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肺炎链球菌糖代谢蛋白CcpA对荚膜多糖的调控作用

发布时间:2017-11-25 19:04

  本文关键词:肺炎链球菌糖代谢蛋白CcpA对荚膜多糖的调控作用


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【摘要】:【目的】研究肺炎链球菌糖代谢蛋白CcpA对肺炎链球菌荚膜多糖(CPS)的调控作用。【方法】利用大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)工程菌原核表达CcpA蛋白,使用Ni2+亲和层析的方法纯化蛋白。利用纯化后的CcpA蛋白免疫昆明小鼠并制备多克隆抗体;采用ELISA法测定抗CcpA抗体效价。随后,利用Westertn blot方法分析CcpA蛋白在肺炎链球菌中的保守性。另外,利用EMSA方法分析CcpA与cps基因座启动子区域片段的结合。最后,构建ccpA基因缺失株和ccpA基因回复株;利用ELISA法测定野生D39菌株、ccpA基因缺失株和ccpA基因回复株的荚膜多糖含量。【结果】Western blot结果显示CcpA蛋白在多种血清型的肺炎链球菌均有表达,CcpA蛋白可与cps基因座启动子区域结合,且呈剂量依赖性;ccpA基因缺失时,细菌CPS含量升高,回复表达CcpA蛋白后,CPS含量显著降低。【结论】CcpA是肺炎链球菌中一种保守表达的蛋白,可通过调节cps基因座启动子负性调控肺炎链球菌荚膜多糖的表达。
【作者单位】: 重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室;遵义医学院第三附属医院检验科;
【基金】:高等学校博士学科点专项科研基金联合资助课题——肺炎链球菌荚膜多糖cps基因座转录调控的分子机制研究(20135503110004)~~
【分类号】:R378
【正文快照】: 微生物学报Acta Microbiologica Sinica55(6):732-738;4 June 2015ISSN 0001-6209;CN 11-1995/Qhttp://journals.im.ac.cn/actamicrocn肺炎链球菌糖代谢蛋白Ccp A对荚膜多糖的调控作用王丽滨1,徐红梅1,吴凯峰2,郑玉强1,王建敏1,马峰1,张雪梅1,尹一兵1,张群1*1重庆医科大学检验

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本文编号:1227042

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