Tn5细胞中单链抗体基因抗人重组质粒分子的表达分析

发布时间：2017-11-27 15:04

  本文关键词：Tn5细胞中单链抗体基因抗人重组质粒分子的表达分析

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【摘要】：目的研究Tn5细胞中单抗抗人重组质粒(B7-2)基因的表达及其活性。方法基于具备信号肽单抗抗人B7-2构建,构建系统Bac-to-Bac并含单抗抗人B7-2杆状重组病毒AcBacmid单抗B7-2,对Tn5细胞采用不同感染复数(MOI)实施感染,进行24、48、72h不同时点细胞蛋白活性的分泌表达,并分析人外周血中单个核细胞受Raji刺激呈增殖表达,予以单抗抑制的效果。结果应用不同MOI对Tn5细胞感染,达72h后进行细胞收集,予以聚丙烯酰氨凝胶电泳(PAGE-SDS)分析,其MOI为1~10表达目的蛋白的量,确定最佳MOI为5;MTT法下自动酶标仪波长570nm位置吸光度,其吸光值的大小同细胞PBMC增殖可呈正相关;各组吸光值显示细胞Raji刺激外周血单个核细胞(PBMC)呈增殖表达,单抗抗人B7-2可以抑制Raji细胞刺激PBMC出现的增殖效应。结论单抗B7-2抗原抗体相结合的活性,以及对PBMC产生的抑制效应均存在,但未见单抗B7-2效应明显表达,有待进行更进一步的试验研究。
【作者单位】： 襄阳市中医医院检验科;
【基金】：湖北省科技计划自然科学基金资助项目(2011CDB298)
【分类号】：R392
【正文快照】： 因为细胞Tn5是能够使分泌性蛋白表现呈高水平分泌的理想型宿主,同时昆虫细胞对该指标表达的效率也比较显著,还能够将悬浮培养甚至无血清培养达到快速适应,因此AcBacmid重组杆状病毒单抗人重组质粒(B7-2)上清液中能使Tn5细胞感染[1]。本研究基于具备信号肽单抗抗人B7-2构建,构

【参考文献】

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【共引文献】

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【相似文献】

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