精液凝固蛋白I活性片段的表达及活性分析

发布时间：2017-11-29 07:04

  本文关键词：精液凝固蛋白I活性片段的表达及活性分析

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【摘要】：目的：制备重组Semenogelin (Sg)及其不同的小分子衍生肽并研究其对精子活动的影响。 方法：用分子克隆技术从精囊中提取精囊组织总RNA,经逆转录成cDNA,设计特异性的引物,通过PCR扩增Sg的N端和C端片段的DNA,将DNA插入质粒载体PET32a,筛选出序列正确的阳性克隆,转染BL21大肠埃希菌,通过诱导表达重组人类Sg的N端和C端片段,用镍柱亲和纯化重组蛋白,通过盐透析恢复活性,通过梯度密度离心法得到正常生育男性活动精子进行抑制试验分析,研究重组Sg的C端和N端片段对精子活动的影响。 结果：重组Sg的N端片段在200pg/个精子的浓度下具有抑制精子运动的作用(P0.001),C端片段对精子运动同样存在抑制作用(P0.05)。结论：Sg分子中存在明显抑制精子活性的氨基酸片段。 结论：Sg分子中存在明显抑制精子活性的氨基酸片段。Sg24-163具有明确的精子抑制活性。Sg164-283同样具有一定的精子抑制活性。且他们的精子抑制活性呈时间相关性。
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R321.1

【参考文献】

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1 王增军;吴宏飞;钱立新;乔迪;邵剑锋;张炜;眭元庚;徐正铨;;人类精子表面附睾蛋白激酶抑制剂Eppin和精囊凝固蛋白Semenogelin的相互作用研究[J];中华男科学杂志;2006年05期

2 王增军;张炜;吴宏飞;眭元庚;;精囊蛋白Semenogelin抑制精子活动的活性片段分析[J];中华男科学杂志;2007年01期

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本文编号：1236574