小鼠肝内胆管上皮细胞的分离与鉴定

发布时间：2017-12-02 23:31

  本文关键词：小鼠肝内胆管上皮细胞的分离与鉴定

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【摘要】：为建立一种简单可靠的小鼠肝内胆管上皮细胞(MIBECs)分离培养方法,用Ⅳ型胶原酶进行门静脉灌注,取出肝内胆管,用DNaseⅠ、pronase E和Ⅳ型胶原酶分类消化,小鼠肝内胆管组织细小、均匀的细胞团培养于含100mL/L胎牛血清(FBS)和10ng/mL表皮生长因子(EGF)、肝细胞生长因子(HGF)和胰岛素转铁蛋白硒(ITS)的DMEM/F12培养基中。细胞贴壁后,利用细胞角蛋白19免疫荧光法鉴定目的细胞。在培养的过程中,用CCK8测定细胞的生长曲线。结果显示,成功分离出MIBECs,细胞纯度约95%。细胞培养3d~7d内呈对数生长状态。以上结果表明本分离培养方法是一种简单可靠的小鼠肝内胆管上皮细胞分离纯化培养技术。
【作者单位】： 徐州医学院病原生物学与免疫学教研室感染与免疫实验室;
【基金】：国家自然科学基金项目(81171590,31302077) 家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放课题(SKLVEB2013KFKT005) 江苏高校优势学科建设工程资助项目(2014年)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 肝内胆管上皮细胞(intrahepatic bile duct epi-thelial cells,IBECs)约占肝细胞总数的5%,其在肝内胆道系统内形成复杂的网状管形结构[1]。IBECs具有复杂的生理代谢功能,参与肝脏的代谢、排泌、免疫等生理过程,在肝脏疾病的发生发展过程中起一定的作用。研究表明,常见的肝内胆

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 高建军;马利林;朱建伟;戴进;刘建明;王伟;;壳聚糖-胶原复合载体对肝内胆管上皮细胞生长的影响[J];肝胆胰外科杂志;2006年03期

2 张柳平;邵根宝;潘耀谦;;成年小鼠睾丸间质细胞的分离、鉴定及功能检测[J];动物医学进展;2013年09期

3 杨航;易琼;李圆方;张小艺;王鲁;;两种不同消化法对小鼠乳腺上皮细胞培养的影响[J];动物医学进展;2014年03期

4 李郑红;陆伦根;;胆管细胞免疫生物学研究进展[J];肝脏;2014年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 邓世康;袁s，

本文编号：1246690