人尿源干细胞用于组织工程构建的可行性研究

发布时间：2017-12-06 02:11

  本文关键词：人尿源干细胞用于组织工程构建的可行性研究

  更多相关文章： 组织工程 尿源干细胞 诱导多潜能干细胞 诱导分化 复层细胞膜片

【摘要】：目的通过对尿源干细胞与尿源诱导多潜能干细胞进行多向诱导分化比较,并利用诱导后的平滑肌样细胞进行复层细胞膜片构建,探讨两种干细胞用于组织工程构建的可行性。 方法将尿源干细胞分别向平滑肌、内皮、神经细胞方向诱导分化,通过实时定量-聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)、细胞免疫荧光染色鉴定多向诱导后的特异性mRNA及蛋白表达情况。将诱导后的平滑肌样细胞转移入温度敏感型培养皿(Nunc Upcell)中,通过降低温度获得单层细胞膜片,并将单层细胞膜片进行多次叠加,来获得复层平滑肌细胞膜片。同时对前期实验获得的尿源诱导多潜能干细胞进行多向诱导分化,并进行qRT-PCR、细胞免疫荧光染色鉴定多向诱导后的特异性mRNA及蛋白表达情况。对两种细胞的诱导效果进行比较,探讨其用于组织工程构建的可行性。 结果(1)尿源干细胞向平滑肌、内皮细胞方向诱导的14天过程中,Oct4、 Sox2、Nanog等多潜能基因的相对表达量下降,而平滑肌、内皮细胞特异性标志物的表达明显增多。(2)尿源干细胞在向神经细胞方向诱导14天后,除Nestin基因表达增高,其它基因表达及细胞形态未见明显变化。(3)诱导后的平滑肌样细胞结合温度敏感型培养皿可获得复层平滑肌细胞膜片。(4)尿源诱导多潜能干细胞在平滑肌、内皮细胞方向诱导效果均优于尿源干细胞,而神经细胞方向诱导后可形成神经祖细胞特有的“玫瑰花环”样结构,在神经细胞特异性基因的表达明显增高的同时,Sox2基因表达也维持在较高水平。 结论本研究发现尿源干细胞向平滑肌和内皮细胞方向诱导效果较好,而神经细胞方向诱导效果欠佳。结合温度敏感型培养皿可获得诱导后平滑肌复层细胞膜片。尿源干细胞与诱导多潜能干细胞分别向平滑肌、内皮和神经细胞方向进行诱导分化比较后发现,诱导多潜能干细胞具有多向分化潜能,相比尿源干细胞分化能力更好,在组织工程方面具有更好的应用前景。
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329.2

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 Ching-Shwun Lin;;Advances in stem cell therapy for the lower urinary tract[J];World Journal of Stem Cells;2010年01期

，

本文编号：1256989