大电导钙激活钾通道对大鼠骨髓间充质干细胞增殖影响的研究

发布时间：2017-12-07 14:08

  本文关键词：大电导钙激活钾通道对大鼠骨髓间充质干细胞增殖影响的研究

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【摘要】：目的：通过体外开放和拮抗大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs)细胞膜大电导钙激活钾通道(BKca)，观察干预离子通道对BMSCs增殖的影响并探讨其机制。 方法：该研究分离培养原代大鼠BMSCs，稳定传至3代。采用BKca通道特异性开放剂(NS1619)和拮抗剂(IBTX)对BMSCsS进行体外干预，，根据干预条件不同，细胞分为4组：Control组、DMSO组(溶剂对照组)、NS1619组、IBTX组。平板克隆、MTT检测细胞克隆形成能力以及细胞增殖活力;流式细胞术分析细胞周期分布及细胞凋亡率;Western blot、定量PCR比较周期蛋白cyclin D1在基因和蛋白表达水平上的差异;整细胞膜片钳技术分析BMSCs细胞膜电生理特性。 结果：（1）成功分离培养原代大鼠BMSCs,并稳定传至第3代。（2）NS1619组细胞膜K+外向电流较Control组振幅增大(P0.01)；（3）NS1619组细胞增殖能力和克隆形成能力较Control组增强(P0.05),凋亡较Control组减少(P0.05)；（4）此外NS1619组G1期细胞数明显小于Control组(P0.01)，G2期细胞数明显大于Control组(P0.05)，激活BKca通道明显促进BMSCs从G1期向S期过渡；（5）Western blot、定量PCR都显示激活BKca通道导致BMSCs细胞周期蛋白及mRNA表达上调。（6）而拮抗BKca通道则相反，IBTX组检测的各组值均与NS1619组相反。DMSO组各检测值与Control组无明显差异(P0.05)，溶剂对本实验不造成干扰。 结论：根据实验结果推测：（1）开放BKca通道可以通过影响BMSCs周期进程最终调节细胞增殖。（2）该作用可能与BKca具有调节细胞膜K+电流外流的电生理特性有关。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329.2

【参考文献】

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本文编号：1262632