骨痹合剂对去双前肢直立联合Hulth法大鼠膝骨性关节炎模型CollagenX、Aggrecan作用观察

发布时间：2017-12-09 04:07

  本文关键词：骨痹合剂对去双前肢直立联合Hulth法大鼠膝骨性关节炎模型CollagenX、Aggrecan作用观察

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【摘要】：目的：建立一种与人类膝关节骨性关节炎发病过程相似的去双前肢直立联合Hulth法大鼠膝骨性关节炎模型，在此模型成功的基础上，观察骨痹合剂对该模型Collagen X、Aggrecan表达的影响。 方法：选择48只10天龄SD幼鼠，随机分为正常对照组、直立组、直立联合假Hulth组、直立联合Hulth组（共4组，每组12只）。正常对照组不做任何处理；其余三组在腹腔麻醉下去除双前肢，手术后置于原母鼠饲养笼内饲养。直立联合假Hulth组在去除双前肢四个月后行假Hulth手术；直立联合Hulth组在去除双前肢四个月后行Hulth手术。四个组在第二次手术后1个月，腹腔麻醉下处死，取下四组的膝关节，通过固定、脱钙、脱水、包埋、切片、捞片、烤片，行HE染色、甲苯胺蓝染色、藏红固绿染色及免疫组化观察分析。在评价模型成功的基础上，再选择52只10天龄SD幼鼠，在腹腔麻醉下去除双前肢，术后置于原母鼠饲养笼内饲养，去除双前肢后四个月行Hulth手术，在Hulth手术后1个月时随机分为空白对照组、骨痹合剂组、氨糖美辛组、生理盐水组（共4组，每组13只），每组处死3只，评价模型，在模型成功的基础上，骨痹合剂组按0.5ml/100g体重给予骨痹合剂灌胃；氨糖美辛组按2mg/100g体重给予氨糖美辛（溶于同体积的生理盐水里）灌胃；生理盐水组按0.5ml/100g体重给予生理盐水灌胃；空白对照组不做任何干预，连续灌胃给药4周后，麻醉处死相对应的各组大鼠，取下膝关节通过固定、脱钙、脱水、包埋、切片、捞片、烤片，行HE染色、甲苯胺蓝染色、藏红固绿染色及免疫组化观察分析。 结果：组织形态学观察正常对照组HE染色、甲苯胺蓝染色、藏红固绿染色显示关节软骨表层光滑、平整，软骨细胞分布均匀，排序整齐，各层次清晰。直立组、去双前肢联合假Hulth组、直立联合Hulth组显示关节面软骨表层溃疡或裂隙，甚至出现局部缺损，软骨细胞数量明显减少，软骨层染色不均，局部出现失染现象；关节各层软骨细胞出现簇集样生长，深层可见肥大软骨细胞；尤以直立联合Hulth组最为明显。通过各组药物干预，与正常对照组、生理盐水组比较，骨痹合剂组、氨糖美辛组的关节软骨表层较光滑、平整，关节表面较连续，软骨细胞分布较均匀，排序较整齐，各层次较清晰，无明显细胞簇集现象，潮线较完整，局部染色较均匀。 结论：成功建立了去双前肢直立、去双前肢直立联合假Hulth、去双前肢直立联合Hulth三种模型，其中去双前肢直立联合Hulth模型膝关节退变更为典型，此模型制作简便，可重复性强，与人类直立状态膝骨性关节炎发病机制相似，，可为进一步研究膝骨性关节炎发病机制及开发有效治疗措施奠定了基础。骨痹合剂可延缓去双前肢直立联合Hulth模型软骨退变状态，可通过上调细胞外基质Aggrecan表达、下调Collagen X表达，延缓膝骨性关节炎软骨的退变进程。
【学位授予单位】：云南中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R274.9;R-332

【参考文献】

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本文编号：1269002