脂肪干细胞来源的生长因子对皮肤成纤维细胞迁移和增殖的影响

发布时间：2017-12-10 18:30

  本文关键词：脂肪干细胞来源的生长因子对皮肤成纤维细胞迁移和增殖的影响

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【摘要】：背景：脂肪干细胞条件培养液（adipose stem cell-conditioned medium，ASC-CM）中富含各类脂肪干细胞（adipose stem cells，ASCs）来源的细胞因子。目前研究证实，ASC-CM可以促进皮肤创伤修复，皮肤成纤维细胞是一类几乎参与整个创伤修复过程的重要效应细胞，其迁移与增殖是创伤修复首要的关键环节。 目的：研究ASC-CM中表皮生长因子（EGF），血小板源性生长因子（PDGF），血管内皮生长因子（VEGF），成纤维细胞生长因子（bFGF）在创伤愈合过程中对皮肤成纤维细胞迁移和增殖的作用机制。 方法：（1）采用蛋白芯片技术，检测ASC-CM中包括EGF、PDGF、VEGF以及bFGF在内的507种细胞因子的含量（信号值，SV）；（2）采用划痕实验和transwell小室迁移实验，在ASC-CM中分别加入0、1、10、20、50、100ng/ml浓度的EGF、PDGF、VEGF和bFGF，上述各因子的中和抗体，，及上述单一因子诱导皮肤成纤维细胞迁移24h后，检测其迁移率；（3）采用CCK-8实验，诱导皮肤成纤维细胞增殖3d后，检测其增殖率，分组同上。 结果：（1）ASC-CM中EGF（SV=458.0）、PDGF（SV=363.5）、VEGF（SV=360.5）、以及bFGF（SV=389.5）信号值均大于300；（2）相较于单一因子，ASC-CM对成纤维细胞的迁移有明显的促进作用。其中，PDGF、VEGF和bFGF对细胞迁移的促进作用显著，且随着浓度的上升而增加，PDGF在50ng/ml时、VEGF在20ng/ml时、bFGF在20ng/ml时达到各自的平台期；在ASC-CM中分别加入PDGF、VEGF和bFGF的中和抗体后，促进作用可被明显抑制；（3）相较于单一因子，ASC-CM对成纤维细胞的增殖有明显的促进作用。其中，EGF和bFGF对细胞增殖的促进作用显著，且随着浓度的上升而增加，并分别在50ng/ml和20ng/ml时达到平台期；在ASC-CM中分别加入EGF和bFGF的中和抗体后，促进作用可被明显抑制。 结论：相较于单一因子，ASC-CM可明显促进皮肤成纤维细胞的迁移和增殖，其中所含有的PDGF、VEGF和bFGF对细胞迁移促进作用非常明显，且具有浓度依赖性；EGF和bFGF对细胞增殖促进作用非常明显，且具有浓度依赖性。因此ASC-CM对皮肤创伤修复的促进作用优于单一因子；同时，在应用ASC-CM时应注意选择适宜的细胞因子浓度，可更有效地促进成纤维细胞的迁移和增殖。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R329.2

【共引文献】

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本文编号：1275478