miR-486-5p在氧化应激引起人骨髓间充质干细胞凋亡中的作用

发布时间：2017-12-15 04:04

  本文关键词：miR-486-5p在氧化应激引起人骨髓间充质干细胞凋亡中的作用

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【摘要】：目的:观察microRNA-486-5p(miR-486-5p)在氧化应激引起人骨髓间充质干细胞(h MSCs)凋亡中的作用并探讨其作用机制。方法:h MSCs经培养鉴定后分为5组:空白对照组、H2O2组、miR-486-5p模拟物+H2O2组、抑制物(αnti-miR)+H2O2组及相应的阴性对照(scrambled control)+H2O2组。荧光定量PCR(real-time PCR)检测氧化应激诱导h MSCs凋亡过程中miR-486-5p的表达变化。用脂质体分别转染miR-486-5p的模拟物、抑制物及阴性对照到h MSCs。应用MTT、Hoechst标记和流式细胞术的方法检测miR-486-5p对氧化应激介导细胞活性下降及凋亡效应的影响,Western blotting检测凋亡相关蛋白、Akt与其磷酸化水平,采用试剂盒测定caspase-3活性。结果:H2O2诱导h MSCs凋亡过程中miR-486-5p的表达较对照组显著下降(P0.05)。与阴性对照组相比,在h MSCs中过表达miR-486-5p,能使细胞在氧化应激情况下活性显著下降,凋亡发生率增高,蛋白Bcl-2/Bax比值、caspase-3酶原含量及Akt磷酸化水平降低,caspase-3活性增强;而使用抑制物阻遏miR-486-5p的作用后,细胞在氧化应激条件下活性增加,凋亡发生率降低,蛋白Bcl-2/Bax比值及Akt磷酸化水平升高,caspase-3活性下降。结论:过表达miR-486-5p促进氧化应激引起的h MSCs凋亡,阻遏miR-486-5p的作用抑制氧化应激条件下的h MSCs凋亡,其中作用机制可能与调控Akt通路有关。
【作者单位】： 广州医科大学附属第二医院广州心血管疾病研究所;
【基金】：广州市属高校科研项目(No.2012C230) 广东省科技计划(No.2013B021800198) 国家自然科学基金青年基金资助项目(No.81401156)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)作为成体干细胞的一种,由于来源方便,没有免疫排斥反应,无致瘤性,是较为理想且具有临床运用前景的一类干细胞。移植BMSCs治疗心梗的动物实验和临床前期试验取得了令人鼓舞的成果,但临床试验效果差异较大,而且获益主

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本文编号：1290520