死亡受体通路相关蛋白在激素性股骨头缺血坏死动物模型中的表达
发布时间:2017-12-18 18:14
本文关键词:死亡受体通路相关蛋白在激素性股骨头缺血坏死动物模型中的表达
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【摘要】:目的:检测Fas、TNFR1、DR3、caspase-8在激素性股骨头缺血坏死幼兔动物模型股骨头组织中的表达,探讨调控激素性幼兔股骨头缺血坏死股骨头组织细胞凋亡的主要受体通路。 方法:选用2月龄健康新西兰白兔40只,雌雄各半,体重1.3~1.8kg。随机分为两组:激素注射组30只,对照组10只,激素注射组每周2次臀肌注射糖皮质激素7.5mg/kg(0.3ml/kg),对照组每周2次注射等体积的生理盐水,共8周。于第一次注射后第4、8周末行双髋关节X线正位片、CT检查,所有实验动物于第一次注射后第8周末处死,取双侧股骨头,部分行组织病理学检查,部分用RCR的方法检测凋亡蛋白的表达。根据影像学及组织病理学结果确定是否发病将激素注射组分为发病组和未发病组。用RT-PCR方法检测Fas、TNFR1、DR3、caspase-8在三组实验动物股 骨头中的表达情况,比较各凋亡蛋白在三组中的表达差异。 结果: 1.激素注射组30只,存活26只,根据影像学及组织病理学结果判定6只实验动物为股骨头坏死阳性(发病组),发生率约为23.08%(6/26)。 2.影像学情况:激素注射组股骨头出现骨密度增高,骨纹理消失,骨骺变小,高度下降,髋关节间隙增宽等情况。 3.组织病理学情况:激素注射组出现骨小梁稀疏、变细,部分断裂,骺板细胞排列不规则,软骨细胞倾斜;发病组(n=6)出现骨陷窝中骨细胞核固缩、变形、边聚,空骨陷窝增多,而未发病组(n=20)及对照组(n=10)股骨头仅见少量骨陷窝空缺等表现。第8周末,发病组、未发病组骨小梁面积与对照组相比,统计学差异显著(q=27.35,25.42,P0.01);发病组骨陷窝空缺率与未发病组、对照组比较,统计学差异显著(q=10.77,12.53,P0.01)。 4. RT-PCR显示:Fas在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为(161.58±29.79)、(110.89±10.39)、(92.77±14.07),发病组的表达量与对照组相比,统计学差异显著(t=4.21,P0.01),未发病组与对照组相比,差异无统计学意义(t=2.10, P0.05); DR3在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为(105.43±4.78)、(103.12±8.71)、(94.55±8.14),组间比较,差异无统计学意义(t=0.58,1.69,1.54,P0.05);TNFR1在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为(118.39±15.25)、(103.59±10.4)、(93.76±9.49),发病组与对照组相比,统计学差异显著(t=2.94,P0.01);caspase-8在发病组、未发病组、对照组的相对表达量分别为(153.42±27.56)、(115.03±17.1)、(92.48±16.43),发病组与对照组相比,统计学差异显著(t=3.86,P0.01)。 5.线性回归分析显示:在Fas、DR3、TNFR1的共同作用下,只有Fas能够显著的预测caspase-8,,并且回归方程回归效应显著,回归方程能够解释68.1%的变异,而DR3和TNFR1对caspase-8的回归效应不显著,说明Fas是影响caspase-8的主要因素。 结论:Fas介导的死亡受体通路可能在股骨头缺血坏死的过程中发挥主要调控作用。
【学位授予单位】:遵义医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R681.8;R-332
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本文编号:1305128
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