GFP转基因小鼠骨髓间充质干细胞纯化方法的研究
本文关键词:GFP转基因小鼠骨髓间充质干细胞纯化方法的研究 出处:《口腔医学研究》2015年04期 论文类型:期刊论文
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【摘要】:目的:应用两种不同方法培养纯化绿荧光蛋白(GFP)转基因小鼠骨髓间充质干细胞,以探求提高GFP小鼠骨髓间充质干细胞纯化效率的方法。方法:取4~6周龄GFP小鼠股骨全骨髓,采用贴壁法进行体外培养。待细胞融合至约80%,将细胞分为两组,分别采用常规法和改良法进行消化传代。荧光显微镜下观察各组细胞荧光状态及形态学特征,MTT法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞表面标志物及绿荧光蛋白表达率,体外诱导观察其成骨、成脂能力。结果:贴壁法获得数量较多,形态多样的原代细胞。随着传代次数的增加,细胞形态一致性不断增高。与传统方法相比,改良法在不影响细胞增殖、分化潜能,不影响其GFP表达率的前提下,可以更早获得纯度较高的细胞。结论:改良法可提高纯化小鼠骨髓间充质干细胞效率,为其用于进一步研究工作提供基础。
【作者单位】: 南方医科大学南方医院牙体牙髓病-国家临床重点专科;南方医科大学口腔医学院;
【基金】:国家自然科学基金面上项目(编号:81371137)
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchy-mal stem cells,BMSCs)以其丰富的来源和多向分化潜能成为干细胞治疗的研究热点。然而,骨髓中间充质干细胞所占的比例很低,如何为细胞移植及基因治疗提供数量充足、活性良好的BMSCs仍是国内外学者关注的问题[1~3]。绿色荧光蛋白(greenf
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