纳升级反相液相色谱-串联质谱法分析麦氏弧菌蛋白质组
本文关键词:纳升级反相液相色谱-串联质谱法分析麦氏弧菌蛋白质组 出处:《安徽农业科学》2015年33期 论文类型:期刊论文
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【摘要】:[目的]较系统地研究分析麦氏弧菌提取蛋白质。[方法]利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和纳升级反相液相色谱-串联质谱(nano-RPLC-MS/MS)法系统分析了来源于美国龙虾的一株麦氏弧菌F5-1提取总蛋白和总蛋白直接酶解产物,并进行数据库检索鉴定蛋白质。纳升级反相液相色谱分析条件为:上样量为5μl,经C18预柱(200μm×0.5 mm,3μm,120姒)脱盐10 min,再经过Chrom XP C_(18)-CL毛细管柱(75μm×15 cm,3μm,120姒)分析,2%乙腈(0.1%甲酸)-98%乙腈(0.1%甲酸)梯度洗脱90 min,采用ESI-Q-TOF MS,在IDA采集模式下分析鉴定麦氏弧菌提取总蛋白酶解产物。[结果]直接酶解鉴定到1 538种蛋白质,通过Gene Ontology分析了麦氏弧菌F5-1提取总蛋白的分子功能、生物进程和细胞组分。提取的麦氏弧菌蛋白具有催化、结合、结构分子、转录调节因子等功能活性,其中催化活性的蛋白比例较大,且多为参与代谢进程的相关酶类。[结论]研究可为麦氏弧菌蛋白质组学的深入研究奠定基础。
【作者单位】: 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心;ABSCIEX公司上海应用实验室;
【基金】:国家质检总局科技项目(2012IK305,2013IK196,2015IK203)
【分类号】:R3416;O657.63
【正文快照】: 麦氏弧菌(Vibrio metschnikovii)是国际公认的11种致病性弧菌之一,也是引起感染性腹泻的致病菌[1],主要能引起人类的创伤性感染和败血症[2]。目前对于麦氏弧菌检测方法的研究主要集中在传统的分离鉴定和分子生物学技术等方面[3],而对提取的麦氏弧菌蛋白进行系统分析目前未见报
【参考文献】
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【相似文献】
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,本文编号:1310930
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