IL1RAP单克隆抗体的制备与鉴定

发布时间：2017-12-22 14:55

本文关键词：IL1RAP单克隆抗体的制备与鉴定　出处：《中国实验血液学杂志》2015年04期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的:制备针对白血病干细胞(LSC)表面标志蛋白IL1RAP(IL-1 receptor accessory protein)的特异性单克隆抗体并对其进行鉴定。方法:杂交瘤细胞3H6E10、10D8A7种植BALB/c小鼠腹腔,收获腹水,纯化后得到特异性抗人IL1RAP的单克隆抗体。分别应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Nondenaturing-PAGE)、ELISA和Western blot法对纯化单克隆抗体分别进行抗体纯度、效价和敏感性检测。结果:获得了两种IL1RAP纯化单克隆抗体,命名为3H6E10 Mc Ab和10D8A7 Mc Ab,其纯度分别为95%和94%;两种纯化的单克隆抗体效价为1∶81000,且能特异性识别IL1RAP纯化蛋白、正常人及白血病病人的细胞内源性蛋白。结论:本研究成功制备了能特异性结合人IL1RAP的纯化单克隆抗体,为将来有效清除体内LSC提供了新途径。
【作者单位】：徐州医学院血液病研究所骨髓干细胞重点实验室;徐州医学院附属医院血液科;
【基金】：国家自然科学基金(编号81200376) 江苏省"六大人才高峰"资助(编号2012-WSN-082) 徐州医学院院长专项人才基金(编号2012KJZ13)
【分类号】：R392
【正文快照】： J Exp Hematol 2015;23(4):962-965IL1RAP(IL-1 receptor accessory protein)是最近报道的白血病干细胞(LSC)的表面标志[1,2]。IL1RAP在慢性髓系白血病(CML)病人的LSC上表达显著升高,但在正常造血干细胞(HSC)上不表达或仅低表达,而在正常的造血祖细胞和各种成熟的细胞上,IL1RA

【参考文献】