嗜水气单胞菌鞭毛蛋白基因flaB的克
本文关键词：嗜水气单胞菌鞭毛蛋白基因flaB的克隆、表达及其免疫原性分析 出处：《中国人兽共患病学报》2015年03期 论文类型：期刊论文
【摘要】：目的克隆、表达及纯化嗜水气单胞菌鞭毛FlaB蛋白,比较了它与天然鞭毛蛋白的抗原性,为以后鱼类弧菌病的防治及其疫苗的制备奠定了基础。方法利用PCR扩增出嗜水气单胞菌鞭毛蛋白基因flaB,经确定后将该基因克隆到原核表达载体pET-30a中,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了表达,并用电洗脱法对表达的蛋白进行纯化,用纯化的重组蛋白免疫家兔制备抗血清,并进行Western-blot分析。结果嗜水气单胞菌鞭毛蛋白flaB基因全长912bp,编码303个氨基酸,预测分子量为32kDa,Western-blot结果表明兔抗FlaB血清不仅能与重组鞭毛蛋白发生反应,而且能与天然鞭毛蛋白发生反应。结论鞭毛蛋白FlaB可能是嗜水气单胞菌的重要保护抗原之一,为下一步疫苗的制备奠定了基础。
[Abstract]:Objective to clone, express and purify flagellum FlaB protein of Aeromonas hydrophila, compare its antigenicity with natural flagellin, and lay a foundation for the prevention and cure of Vibrio disease and the preparation of vaccine. By using the method of PCR was amplified from Aeromonas hydrophila flagellin gene flaB, confirmed after the gene was cloned into the prokaryotic expression vector pET-30a, in Escherichia coli BL21 (DE3) was obtained and purified the recombinant protein by electroelution, using purified recombinant protein immunized rabbit antiserum and, Western-blot analysis. Results the flagellin flaB gene of Aeromonas hydrophila was 912bp, encoding 303 amino acids. The predicted molecular weight was 32kDa. Western-blot results showed that Rabbit anti FlaB serum not only reacted with recombinant flagellin, but also reacted with natural flagellin. Conclusion flagellin FlaB may be one of the important protective antigens of Aeromonas hydrophila, which lays a foundation for the preparation of the next vaccine.
【作者单位】： 吉林大学人兽共患病研究所;
【基金】：国家自然科学基金项目(30972277) 吉林大学基本科研业务费项目(200903250)~~
【分类号】：R392
【正文快照】： 嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)属于弧菌科、气单胞菌属,是水生环境中普遍存在的一种细菌,能够感染多种水生和陆生动物,是一种重要的人-兽-鱼共患的细菌病原菌[1]。嗜水气单胞菌可以使淡水鱼类发生疖病和败血症,给水产养殖业带来了严重危害[2]。人感染致病性嗜水气单胞菌
【参考文献】
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【共引文献】
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，本文编号：1339549
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