基于小鼠模型的两种组织干细胞的相关研究

发布时间：2017-12-29 11:12

本文关键词：基于小鼠模型的两种组织干细胞的相关研究　出处：《中国协和医科大学》2010年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】： 内源性肺干细胞指位于肺组织内能自我更新并在特定条件下分化为肺组织的细胞。肺干细胞参与肺组织的稳态维持和损伤修复。在肺内,衰老可能通过影响肺干细胞的再生能力和分化功能导致肺组织结构和功能的变化。衰老是肺纤维化发病的独立危险因素。肌成纤维细胞与肺纤维化的发生密切相关。为了探讨肺干细胞与衰老及肺纤维化间的相互关系,我们进行了肺损伤处理、干细胞分析分选及体外培养。但目前尚无公认的肺干细胞表面标记,我们对远端肺组织干细胞不同表面标记分选的肺干细胞进行体外培养,比较了(CD31-CD45-Sca-1+CD34+和CD31一CD45一Sca-1-EpCAM+)两种分选策略。结果表明CD31-CD45-Sca-1-rEpCAM+肺干细胞表面标记策略更适合于区分远端肺组织的上皮干细胞和间质干细胞。我们通过建立肺损伤小鼠模型来研究在肺损伤修复过程中衰老对小鼠的肺损伤修复能力的影响,进而探讨其肺干细胞的增殖修复能力的差异,以期探讨肺的损伤修复机制。比较不同周龄小鼠的肺干细胞及肺间质干细胞的数量,发现在正常生理状态下增龄对肺干细胞(包括远端肺上皮干细胞和肺间质干细胞/前体细胞)的数量及比例影响不显著。而在肺损伤修复过程中,肺上皮干细胞和肺间质干细胞/前体细胞的比例下降。在衰老过程中肺损伤修复的能力存在明显的减弱趋势。我们对不同月龄小鼠的肺组织细胞中肌成纤维细胞数量进行分析,提示在衰老过程中导致肺间质干细胞的组成发生了变化,向肌成纤维细胞分化的比例升高。这是肺纤维化发生的可能机制之一。 RunX3 (Runt-related transcription factor 3, Runt相关转录因子3)基因与细胞增殖、凋亡、分化有关,对免疫系统疾病,癌症的发生存在影响。为了研究RunX3基因与造血干细胞(Haematopoietic stem cells, HSCs)自我更新及分化能力的关系,我们通过RunX3基因敲除小鼠的竞争性骨髓移植实验进行相关研究。竞争性骨髓移植实验是判断干细胞自我更新能力的标准的实验。移植3月后的受体小鼠利用5-氟尿嘧啶(5-Fluororucail,5-FU)处理以进一步确定RunX3基因敲除小鼠的骨髓造血干细胞在损伤修复情况下的增殖及分化能力。RunX3小鼠供体来源的外周血髓系细胞占总外周血髓系细胞的比例较野生对照鼠高。5-FU处理一周后RunX3-/小鼠供体来源外周血中髓系细胞比例敲除组较野生组高,5-FU处理一月后RunX3-/小鼠供体来源外周血中B细胞比例下降。 RunX3-/小鼠骨髓干细胞供体来源的外周血细胞占总外周血细胞的比例与野生对照鼠相比无明显差异。小鼠在正常生理状态时,RunX3基因对造血干细胞稳态维持及其分化影响不明显。RunX3基因缺失对骨髓短期和长期造血干细胞的自我更新能力的影响不显著,但对骨髓造血干细胞向髓系血细胞的分化能力可能有促进作用。在应激的早期RunX3基因的缺失可能导致了骨髓造血干细胞向髓系细胞的分化增多,而向B淋巴细胞的分化降低。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：中国协和医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R329

【参考文献】