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环磷腺苷葡胺对骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的诱导作用及其机制探讨

发布时间:2017-12-31 17:17

  本文关键词:环磷腺苷葡胺对骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的诱导作用及其机制探讨 出处:《山东医药》2015年42期  论文类型:期刊论文


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【摘要】:目的探讨环磷腺苷葡胺(MCA)诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌细胞分化的机制。方法体外培养BMSCs,将第3代BMSCs接种于96孔板中,分为对照组、MCA组、MCA+LY294002组。MCA组加入1×10-3mmol/L的MCA,MCA+LY294002组加PI3K/AKT信号通路特异性抑制剂LY294002预处理30 min后,再加入1×10-3mmol/L的MCA,两组均诱导3 d后换为普通培养基继续培养。对照组不做任何处理。培养4周后,采用荧光定量PCR法检测心肌特异性基因GATA结合蛋白4(GATA-4)、缝隙连接蛋白43(CX43)mRNA,采用Western blot法检测PI3K/AKT通路相关蛋白PI3K、磷酸化AKT(p-AKT)、磷酸化叉形头转录因子的O亚型(p-Foxo3a)、DOK家族蛋白(DOK5)]的表达。结果 MCA组、MCA+LY294002组GATA-4、CX43 mRNA表达均高于对照组(P均0.01),MCA+LY294002组GATA-4、CX43 mRNA表达均低于MCA组(P均0.01)。MCA组PI3K、p-AKT、pFoxo3a、DOK5表达均高于对照组及MCA+LY294002组(P均0.01)。结论 MCA可诱导BMSCs分化为心肌细胞,其机制可能与激活PI3K/AKT信号通路有关。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) into cardiomyocytes induced by meglumine cyclophosphate (MCA). Methods BMSCs was cultured in vitro. The third generation of BMSCs was inoculated into 96-well plate and divided into control group (MCA group), MCA LY294002 group (MCA group) and MCA group (MCA group). 1 脳 10 -3 mmol / L MCA was added to MCA group. MCA LY294002 group was pretreated with PI3K/AKT signal pathway specific inhibitor LY294002 for 30 min. Adding 1 脳 10 -3 mmol / L MCA, both groups were induced for 3 days and then transferred to normal culture medium. The control group did not do any treatment. After 4 weeks of culture, the two groups were cultured. Myocardial specific gene GATA binding protein 4 (GATA-4N) and gap junction protein 43 (CX43) were detected by fluorescence quantitative PCR assay. PI3K and phosphorylated AKTP-AKT were detected by Western blot assay. Expression of phosphorylated fork head transcription factor O subtype p-Foxo3aOK family protein (DOK5). Results MCA group. The expression of CX43 mRNA in the MCA LY294002 group was higher than that in the control group (P < 0.01). The expression of CX43 mRNA in the MCA LY294002 group was higher than that in the control group (P < 0.01). The expression of CX43 mRNA was lower than that of MCA group (P < 0.01). The expression of DOK5 was higher than that of control group and MCA LY294002 group (P 0.01). Conclusion MCA can induce the differentiation of BMSCs into cardiomyocytes. The mechanism may be related to activation of PI3K/AKT signaling pathway.
【作者单位】: 济宁医学院附属医院;山东省肿瘤医院;
【基金】:山东省医药卫生科技发展计划项目(2013WSB34007)
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 骨髓间充质干细胞(BMSCs)具有多向分化潜能,在特定的诱导条件下可以分化为骨、软骨、神经、心肌等细胞[1~4],成为诱导分化的理想细胞。研究证实,BMSCs诱导分化后的细胞可用于治疗慢性缺血性心力衰竭,改善患者的生存收益,提示BMSCs具有向心肌细胞分化的潜能[5]。环磷腺苷葡胺(M

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号:1360707

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