心理应激诱发抑郁大鼠前额叶皮质DRD1-DRD5 DAT表达的mi-RNA调控机制

发布时间：2018-01-01 16:14

  本文关键词：心理应激诱发抑郁大鼠前额叶皮质DRD1-DRD5 DAT表达的mi-RNA调控机制　出处：《中南大学》2013年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的：研究早期母爱剥夺应激和成年慢性不可预知性应激对SD大鼠行为、前额叶皮质DRD1-DRD5mRNA,DATmRNA及蛋白质表达的影响及mi-RNA的调控机制。 方法：将新生SD雄性大鼠随机分为母爱剥夺应激组(MD)、慢性不可预知性应激组(CUS)和正常对照组(C)。MD组大鼠接受母爱剥夺应激,CUS组大鼠在成年后接受慢性不可预知性应激,对照组不接受任何实验处理。采用强迫游泳实验、糖水偏爱实验和旷场试验评估大鼠焦虑、抑郁样行为。采用实时定量荧光PCR检测前额叶皮质内DRD1-DRD5, DATmRNA和miR-16、miR-200a、miR-207、miR-22、 miR-122、miR-96的表达水平；采用免疫印迹法检测前额叶皮质DRD1-DRD5, DAT蛋白质表达水平。 结果：1.行为学结果：与对照组比较,MD及CUS组大鼠静止漂浮时间增加,糖水偏爱率降低,直立次数减少、大便颗粒数增加(P0.05)；与CUS组比,MD组大鼠静止漂浮时间长,糖水偏爱率降低(P0.05)。2.蛋白表达检测结果：与C组比较,MD组的DRD1、 DRD5、DRD3、DRD4、DAT及CUS组的DRD1、DRD5、DAT、DRD2蛋白质表达上调(P0.05)。与CUS组比较,DRD5蛋白质表达下调,D2样受体及DAT蛋白质表达下调(P0.05)。3.基因表达检测结果：与C组比较,MD组DRD1、DRD5mRNA、DRD3、DRD4、DATmRNA及CUS组的DRD1、DRD5、DRD2、DATmRNA表达上调,与CUS比较,D1样受体、D2样受体及DAT蛋白质表达上调。4.mi-RNA表达检测结果：与C组比较,MD组的miR-207,miR-96的表达降低(P0.05),CUS组的miR-122、miR-22,miR-207表达增加(P0.05)。miR-22、miR-122、miR-96表达水平分别与DRD、DRD5、DAT蛋白表达水平明显相关(P0.05)。5.生物学指标与行为学指标相关结果：DRD1蛋白表达水平与糖水偏爱率相关显著(P0.05); DRD1、 DRD5,DAT蛋白表达水平与静止漂浮时间明显相关(P0.01);DRD5、DAT与直立次数相关(P0.05);DRD1、DRD5, DAT蛋白表达水平与中央格比例相关(P0.01)。 结论：1.不同应激范式可诱发大鼠不同的抑郁样表型。2.不同抑郁表型大鼠前额叶皮质内多巴胺受体、转运体发生差异性的改变。3.miRNA可能参与不同抑郁亚型的发生机制。
[Abstract]:Objective: To study the effects of early maternal stress and adult chronic unpredictable stress on the behavior of SD rats, the expression of DRD1-DRD5mRNA, DATmRNA and protein in prefrontal cortex, and the regulation mechanism of mi-RNA.
Methods: male SD rats were randomly divided into maternal deprivation group (MD), chronic unpredictable stress group (CUS) and normal control group (group C).MD rats received maternal deprivation, CUS group rats received chronic unpredictable stress in adulthood, the control group did not meet by any experimental treatment. The forced swimming test, sucrose preference test and open field test to evaluate rat anxiety, depression like behavior. Detected by real-time quantitative PCR in prefrontal cortex DRD1-DRD5, DATmRNA and miR-16, miR-200a, miR-207, miR-22, miR-122, miR-96 expression; Western blot was used to detect DRD1-DRD5 in prefrontal cortex. The level of DAT protein expression.
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本文编号：1365238