大菱鲆和牙鲆特异性CpG寡聚脱氧核苷酸的筛
本文关键词:大菱鲆和牙鲆特异性CpG寡聚脱氧核苷酸的筛选、鉴定及其免疫效应研究 出处:《中国科学院研究生院(海洋研究所)》2010年硕士论文 论文类型:学位论文
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【摘要】: 近年来的研究发现,寡聚脱氧核苷酸(ODN)具有免疫激活特性,能引起机体的免疫应答。 论文首次筛选出特异性的针对大菱鲆有很好的免疫刺激效应的寡聚脱氧核苷酸-ODN 205。通过菌落计数和短期保护效应得出腹腔注射ODN 205和含有ODN 205的质粒pCN5对抑制哈维氏弧菌和迟缓爱德华氏菌侵染有显著效应;此外我们发现经ODN 205和质粒pCN5刺激的大菱鲆天然免疫指标明显上升;为了验证ODN 205和pCN5是否对大菱鲆获得性免疫产生影响,我们把ODN 205和pCN5分别与哈维氏弧菌的蛋白疫苗DegQ共同免疫鱼体,结果证实pCN5能够对DegQ产生明显的佐剂效应并且免疫鱼体血清的抗体效价明显升高。 此外,我们还从十六条人工合成的CpG ODNs中筛选出能够显著抑制细菌侵染牙鲆的四条ODNs,将它们连到真核表达载体pCN3后以DNA疫苗(pCN6)形式注射牙鲆,结果发现pCN6免疫过的牙鲆对两种不同的致病菌(迟缓爱德华氏菌和嗜水气单胞菌)具有显著的保护效应。
[Abstract]:Recent studies have shown that oligo deoxynucleotides (ODN) have immune activation characteristics, which can cause the immune response of the body.
For the first time to screen the specific for turbot has good immune stimulatory effect of oligodeoxynucleotides -ODN 205. by colony counting and the short-term protective effect of intraperitoneal injection of ODN 205 and ODN 205 plasmid containing pCN5 had a significant effect on the inhibition of Vibrio harveyi and Edwardsiella tarda infection; in addition we found turbot immune the ODN 205 index and plasmid pCN5 stimulation increased significantly; in order to verify the ODN 205 and the effect of pCN5 on turbot acquired immunity, we use ODN 205 and pCN5 respectively with the Vibrioharveyi protein DegQ vaccine co immunized fish, the results demonstrated that pCN5 can produce the adjuvant effect of DegQ obviously and the antibody titer of fish the serum was significantly increased.
In addition, we also from sixteen synthetic CpG ODNs screened four ODNs can significantly inhibit the bacterial infection of flounder, are connected to the eukaryotic expression vector pCN3 to form DNA vaccine (pCN6) injection of flounder, the results showed that pCN6 had been immunized flounder on two different pathogenic bacteria (Edwardsiella hydrophila) has a significant protective effect.
【学位授予单位】:中国科学院研究生院(海洋研究所)
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R392
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,本文编号:1391762
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