稳定敲低MYH10基因细胞株的建立

发布时间：2018-01-07 11:16

本文关键词：稳定敲低MYH10基因细胞株的建立　出处：《医学研究杂志》2015年11期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的构建稳定敲低MYH10基因的COS-7细胞株。方法在293TX细胞中进行病毒的包装,用获得的高效价慢病毒感染COS-7细胞,通过免疫印迹和荧光显微镜,检测病毒感染后COS-7细胞MYH10蛋白表达的变化。结果在构建的两种重组质粒中,MYH10-lentiviral shRNA-2在转染后表现出明显的干扰作用,感染后能明显下调COS-7细胞的MYH10蛋白表达。结论病毒感染的COS-7细胞可明显抑制COS-7细胞内源MYH10的表达,说明了稳定敲低MYH10基因的COS-7细胞株的建立,为进一步研究MYH10在相关疾病中的功能奠定了基础。
[Abstract]:COS-7 cell line objective to construct stable knockdown of MYH10 gene. Methods the virus in 293TX cells for packaging, obtained high titer lentivirus infected COS-7 cells by Western blot and fluorescence microscopy, the expression changes of COS-7 cells MYH10 protein detection after virus infection. Results in the two kinds of recombinant plasmid, MYH10-lentiviral shRNA-2 exhibit obvious interference effect in transfected expression after infection significantly reduced MYH10 protein expression in COS-7 cells. Conclusion the virus infected COS-7 cells can inhibit COS-7 cell endogenous MYH10, the establishment of COS-7 cell line stable knockdown of the MYH10 gene, which laid the foundation for the further study of MYH10 in related diseases the function.

【作者单位】：中国人民解放军307医院医学工程科;
【基金】：国家自然科学基金青年科学基金资助项目(31400739) 北京市自然科学基金资助项目(5144033)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 非肌肉肌球蛋白重链10(nonmuscle myosin heavychainⅡB,MYH10或NMⅡ-B)是一种由人第17号染色体上的MYH 10基因编码的蛋白,存在于非肌细胞中如血小板、神经细胞、巨核细胞等[1~4],在细胞黏附、迁移、胞质分裂及细胞趋药性等方面发挥着重要的作用,但有关以上作用的机制尚未得到

【参考文献】