肺炎链球菌cps操纵子的启动子序列点突变可导致细菌荚膜缺失

发布时间：2018-01-07 14:04

本文关键词：肺炎链球菌cps操纵子的启动子序列点突变可导致细菌荚膜缺失　出处：《微生物学报》2015年06期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：【目的】明确肺炎链球菌荚膜多糖合成操纵子的启动子序列出现的点突变313713 T→C是否可导致细菌荚膜缺失。【方法】Western blot检测肺炎链球菌突变株SPY1(NC_008533.1 313713 T→C)荚膜多糖含量;实时定量荧光PCR分析荚膜多糖合成基因cps2A、cps2B、cps2C以及cps2D的表达量;构建重组质粒pEVP3-cps promoterD39和pEVP3-cps promoterSPY1,分别转化D39和SPY1菌株,通过β-半乳糖苷酶活性检测来验证转入的启动子序列对细菌荚膜合成的影响,并通过电镜观察荚膜结构和荚膜肿胀试验进一步验证。【结果】肺炎链球菌SPY1的荚膜多糖含量较野生型显著下降,其相关基因cps2A、cps2B、cps2C以及cps2D的表达量较野生型D39均显著降低;与D39-pEVP3-cps promoterD39对比,D39-pEVP3-cps promoterSPY1的β-半乳糖苷酶活性下降了76%,与SPY1-pEVP3-cps promoterD39相比,SPY1-pEVP3-cps promoterSPY1的β-半乳糖苷酶活性下降了约79%;电镜结果显示,重组SPY1-pEVP3-cps promoterD39荚膜可恢复至野生型水平,并且重组D39-pEVP3-cps promoterSPY1(NC_008533.1 313713 T→C)荚膜肿胀试验呈阴性。【结论】荚膜多糖合成操纵子的启动子序列点突变313713 T→C可导致荚膜多糖合成基因表达显著下调,从而引起菌株SPY1的荚膜显著减少甚至缺失。
[Abstract]:In comparison with D39 - pEVP3 - cps - terD39 , the 尾 - galactosidase activity of SPY1 - pEVP3 - cps - terSPY1 decreased by about 79 % .

【作者单位】：重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室;重庆医科大学附属第一医院检验科;重庆医科大学附属第一医院;
【基金】：高等学校博士学科点专项科研基金联合资助课题(20135503110004)~~
【分类号】：R378
【正文快照】： 革兰阳性细菌肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae,S.pneumoniae),是一种人上呼吸道的共生菌。它常引起中耳炎、鼻窦炎、社区获得性肺炎等,严重者可引起菌血症、脑膜炎等,常伴有高发病率和死亡率[1]。荚膜是肺炎链球菌重要的毒力因子,在肺炎链球菌的致病过程中发挥重要作用[2]

【参考文献】