戈登链球菌抗结核粘膜疫苗重构的研究

发布时间：2018-01-15 04:07

  本文关键词：戈登链球菌抗结核粘膜疫苗重构的研究　出处：《重庆医科大学》2009年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】： 目的:构建结核分枝杆菌(MTb)ESAT6基因表达载体并在戈登链球菌GP251中进行分泌表达。 方法:以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板扩增ESAT6基因,将ESAT6基因克隆到质粒PSMB104,生成PSMB104- ESAT6重组载体,用于转化感受态戈登链球菌表达菌株GP251 ,构建戈登链球菌粘膜疫苗重构体。用Tricine-SDS-PAGE和Western印迹检测ESAT6蛋白的表达,并用ELISA技术检测该蛋白的分泌表达量。 结果:经测定证实ESAT6基因表达载体构建成功,转化戈登链球菌表达菌株GP251后可分泌表达出相对分子质量约10KD的ESAT6蛋白,Western印迹证明蛋白有较好的免疫原性。 结论:ESAT6基因表达载体成功构建并能在戈登链球菌GP251中进行分泌表达,为构建新型抗结核粘膜疫苗提供了一些参考。
[Abstract]:Aim: to construct an ESAT6 gene expression vector of Mycobacterium tuberculosis and express it in GP251 of Streptococcus Gordon. Methods: the ESAT6 gene was amplified from the genomic DNA of Mycobacterium tuberculosis H37Rv, and the ESAT6 gene was cloned into plasmid PSMB104. PSMB104- ESAT6 recombinant vector was generated and used to transform the expression strain GP251 of Streptococcus Gordon. The recombinant mucosal vaccine of Streptococcus Gordon was constructed and the expression of ESAT6 protein was detected by Tricine-SDS-PAGE and Western blot. The secretory expression of the protein was detected by ELISA. Results: the ESAT6 gene expression vector was successfully constructed, and the ESAT6 protein with relative molecular weight of about 10KD was secreted after transformed into Streptococcus Gordon expressed strain GP251. Western blot showed that the protein had good immunogenicity. Conclusion the expression vector of ESAT6 gene was successfully constructed and secreted in Streptococcus Gordon GP251, which provided some references for the construction of novel anti-tuberculosis mucosal vaccine.
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R392

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本文编号：1426698