小鼠脐带间充质干细胞的体外诱导分化
本文关键词: 小鼠 脐带间充质干细胞 细胞培养 成软骨诱导 成脂诱导 成骨诱导 出处:《中国实验动物学报》2015年06期 论文类型:期刊论文
【摘要】:目的分离扩增小鼠脐带间充质干细胞(mouse umbilical cord mesenchymal stem cells,m UCMSCs)探讨其是否可诱导成软骨、脂肪和成骨细胞。方法通过贴壁培养法将m UCMSCs体外分离、扩增、纯化,倒置显微镜下观察细胞的形态特征,运用流式细胞仪检测分析细胞的抗原标志表达进行鉴定。运用诱导培养液对分离的m UCMSCs分别定向诱导培养为软骨、脂肪和成骨细胞。结果运用组织贴块培养法可从新鲜脐带中分离到贴壁生长的成纤维样细胞,这些细胞高表达CD29、CD90和CD105,低表达CD34。成软骨诱导后阿新兰染色呈蓝色;成脂诱导后油红O染色,出现红色脂滴;茜红素染色成骨诱导的m UCMSC,可见红色结节。结论贴壁培养法分离培养所获得的m UCMSCs在体外可诱导分化为软骨、脂肪和成骨细胞。
[Abstract]:Objective to isolate and amplify murine umbilical cord mesenchymal stem cells (umbilical cord mesenchymal stem cells) to investigate whether they can be induced into cartilage, fat and osteoblasts. Methods m UCMSCs was isolated, amplified and purified by adherent culture in vitro. The morphological characteristics of the cells were observed under inverted microscope, and the expression of antigen markers was identified by flow cytometry. The isolated m UCMSCs was induced into cartilage by induction culture medium. Results Fibroblast-like cells were isolated from fresh umbilical cord by tissue patch culture. These cells expressed CD29 CD90 and CD105highly, and CD34. the staining of acinylum was blue after chondrogenic induction. After lipogenic induction, red lipid droplets appeared in oil red O staining, and reddish nodules were observed in osteoblast-induced mUCMSCs by hematoxylin staining. Conclusion the m UCMSCs obtained by adherent culture can induce differentiation into cartilage, fat and osteoblasts in vitro.
【作者单位】: 成都军区昆明总医院云南省干细胞工程实验室;昆明医科大学昆明总医院临床学院;军事医学科学院实验动物中心;
【基金】:云南省基金项目(2011HB050,2013DA004) 十二五重大项目(2011ZXJ09201-031) 国家自然科学基金(31272385) 北京市自然科学基金(5152023)
【分类号】:R329.2
【二级参考文献】
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,本文编号:1526931
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