结核杆菌CFP10和ESAT6真核表达载体双转染真核细胞的观察

发布时间：2018-02-28 04:42

  本文关键词： 结核杆菌 真核细胞 CFP- ESAT-　出处：《石河子大学学报(自然科学版)》2015年01期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：为了构建结核分枝杆菌两个毒力因子CFP-10基因和ESAT-6基因共同表达的真核细胞模型,本实验采用脂质体转染方法,将重组表达载体CFP-10-PDs Red1-N1和ESAT-6-PEGFP-N1同时转染真核细胞293FT,通过倒置荧光显微镜和激光共聚焦观察,并经western blot检测分析。结果显示,经双转染的293FT细胞能够分别发出红色和绿色荧光,既能表达CFP-10,又能表达ESAT-6,且表达的蛋白分布于细胞质中,表明模型构建成功。由此可知,构建的这个细胞模型为进一步研究这两种毒力因子在宿主细胞中的作用机制奠定了基础。
[Abstract]:In order to construct eukaryotic cell model of co-expression of CFP-10 gene and ESAT-6 gene of two virulence factors of Mycobacterium tuberculosis, liposome transfection method was used in this study. The recombinant expression vectors CFP-10-PDs Red1-N1 and ESAT-6-PEGFP-N1 were transfected into eukaryotic cells 293FT at the same time. The cells were observed by inverted fluorescence microscope and confocal laser, and detected by western blot. The results showed that 293FT cells with double transfection could emit red and green fluorescence, respectively. Both CFP-10 and ESAT-6 can be expressed, and the expressed protein is distributed in the cytoplasm, which indicates that the model has been successfully constructed. Therefore, this cell model lays a foundation for further study of the mechanism of these two virulence factors in host cells.
【作者单位】： 石河子大学医学院病原生物学与免疫学教研室/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室;石河子大学动物科技学院;石河子大学医学院第一附属医院骨科;
【基金】：国家自然科学基金项目(31060333) 石河子大学高层次人才科研启动资金专项(RCZX201027)
【分类号】：R378.911

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：1545805