下丘脑PVN-ARC Nesfatin-1神经通路构成及对胃牵张敏感神经元放电活动和胃运动调控研究

发布时间：2018-03-09 14:11

本文选题：nesfatin-1　切入点：胃运动　出处：《青岛大学》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的： Nesfatin-1作为一种新近发现的厌食神经肽,尽管已被证明可以调控胃肠运动,但其机制还不明确。本实验拟：①观察nesfaitn-1对大鼠下丘脑弓状核ghrelin敏感性胃牵张(GD)神经元放电活动的影响,以及下丘脑PVN对其调控作用；阐明下丘脑PVN-ARC nesfatin-1神经通路的构成；②观察nesfaitn-1在弓状核内对胃运动的作用及探讨可能的调控机制。方法： ①采用细胞外单位神经元放电、核团微量注射及核团电刺激方法,观察nesfatin-1以及电刺激PVN对ghrelin敏感性GD神经元放电活动的影响。②采用在体胃运动及核团电刺激方法,观察nesfatin-1以及电刺激PVN对清醒自由活动大鼠胃收缩幅度和频率的影响。③采用荧光金(FG)逆行追踪与免疫组化手段,观察下丘脑室旁核PVN-ARC nesfatin-1神经通路的构成。结果： ①ARC共记录到246个神经元放电,164个GD敏感神经元。在88个GD兴奋性(GD-E)神经元中,ARC微量注射ghrelin可兴奋其中62个神经元；而在76个GD抑制性(GD-Ⅰ)神经元中,ghrelin可抑制其中47个神经元；另外,ARC注射nesfatin-1可抑制其中39个ghrelin敏感性GD-E神经元,放电频率显著降低(P0.01)；而在47个ghrelin敏感性GD-Ⅰ神经元中,nesfatin-1可兴奋其中25个神经元,放电频率显著增加(P0.01)。然而,nesfantin-1对ghrelin敏感性GD神经元电活动的作用可被SHU9119部分阻断(P0.05)。②在ARC记录到的62个ghrelin敏感性的GD-E神经元中,电刺激PVN后有21(21/62,33.9%)个被兴奋,14(14/62,22.6%)个被抑制,27(27/62,43.5%)无反应。47个ghrelin敏感性的GD-Ⅰ神经元,电刺激PVN后13(13/47,27.7%)个神经元被兴奋,12(12/47,25.5%)个被抑制,22(22/47,46.8%)无反应。然而,ARC内预先注射抗NUCB2/nesfatin-1抗体,电刺激PVN造成的ARC内ghrelin敏感性的GD-E神经元放电频率明显增加(16/21,76.2%,3.84±0.03Hz vs.4.21±0.03Hz, P0.01), ghrelin敏感性的GD-Ⅰ神经元放电频率明显降低(10/13,76.9%,3.71Hz±0.02Hz vs.3.39±0.02Hz,P0.01).③在体胃运动研究结果显示,ARC微量注射不同浓度的nesfatin-15min后,胃收缩幅度和频率(P0.05～0.01)均显著降低。然而SHU9119可部分阻断nesfatin-1对胃运动的抑制效应(P0.05)。④电刺激PVN可明显增加大鼠胃运动幅度与频率(P0.01～0.001),在电刺激13min左右振幅与频率增加达到高峰。然而在预先注射抗NUCB2/nesfatin-1抗体后,电刺激PVN引起的这一促进胃运动效应能够被进一步增强(P0.01～0.001)。⑤PVN内发现NUCB2/nesfatin-1/荧光金双标神经元。结论：下丘脑弓状核nesfatin-1可影响大鼠ghrelin敏感性GD神经元的放电活动,且抑制胃运动,而该效应可能与黑色素信号通路有关。
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【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R333

【参考文献】