碱性鞘磷脂酶基因剔除鼠的基因型和表型特征
本文选题:碱性鞘磷脂酶 + 基因剔除小鼠 ; 参考:《中国实验动物学报》2015年05期
【摘要】:目的为研究alk-SMase在结肠癌发生发展中的作用提供动物模型的实验数据。方法将野生型(WT,+/+)、杂合子(+/-)、纯合子(KO,-/-)alk-SMase基因剔除小鼠剪尾提取DNA,PCR法作基因型鉴定;取其肝肠组织进行HE染色、激光共聚焦分析以及质谱仪检测,观察和分析不同基因型鼠的表型特征。结果与WT和杂合子比较,KO鼠显示:外观和体重无明显区别;基因型鉴定出现一个条带,其分子量为247 bp;小肠黏膜明显增厚,但alk-SMase表达减弱;质谱分析显示在肠道和肝脏中的鞘磷脂含量增高,1-磷酸鞘氨醇含量增加,而神经酰胺含量降低。结论 alk-SMase KO鼠有明显特征,但其外观和体重与其他基因型比较没有明显区别,为研究alk-SMase的生物功能提供了一个理想的动物模型。
[Abstract]:Objective to provide experimental data for the study of the role of alk-SMase in the development of colon cancer. Methods Wild-type WT-T, / T, heterozygous (/) homozygotes were extracted from the tail of the homozygous mice to identify their genotypes by DNA polymerase chain reaction (DNA-PCR), and their liver and intestines were detected by HE staining, confocal laser analysis and mass spectrometer analysis, and the results were as follows: (1) the liver and intestine tissues were detected by HE staining, laser confocal analysis and mass spectrometer analysis. The phenotypic characteristics of different genotypes of mice were observed and analyzed. Results compared with WT and heterozygote, KO mice showed no significant difference in appearance and body weight, a band with a molecular weight of 247bp was found in genotypic identification, and the intestinal mucosa was thickened, but the expression of alk-SMase was decreased. Mass spectrometric analysis showed that the sphingomyelin content in the intestine and liver was increased, and the sphingosine 1-phosphate content was increased, while the ceramide content was decreased. Conclusion alk-SMase KO mice have obvious characteristics, but their appearance and body weight are not significantly different from those of other genotypes, which provides an ideal animal model for studying the biological function of alk-SMase.
【作者单位】: 南通大学附属肿瘤医院肿瘤研究所中心实验室;南通大学实验动物中心;瑞典LUND大学胃肠营养实验室;
【基金】:江苏省创新创业人才基金(项目号:苏人才2013-41)
【分类号】:R735.35;R-332
【参考文献】
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【共引文献】
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,本文编号:1828542
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