金黄色葡萄球菌tst-1基因敲除菌株的构建
本文选题:金黄色葡萄球菌 + tst- ; 参考:《微生物学杂志》2015年06期
【摘要】:抽提金黄色葡萄球菌834菌株的基因组DNA,PCR克隆扩增tst-1及tst-1的上、下游基因,通过将tst-1上、下游基因分别重组到载体质粒p AULA中,形成同源重组质粒p AULA-Δtst-1,将p AULA-Δtst-1电转入细菌内,进行同源重组,以PCR、Western blot鉴定tst-1基因敲除菌株无tst-1基因片段,且无TSST-1蛋白表达,表明已成功构建金黄色葡萄球菌tst-1基因的敲除菌株。
[Abstract]:The upstream and downstream genes of tst-1 and tst-1 were cloned and amplified by genomic DNA-PCR extraction from Staphylococcus aureus 834 strain. The upstream and downstream genes of tst-1 were recombined into vector plasmid p AULA to form homologous recombinant plasmid pAULA- 螖 tst-1, and pAULA- 螖 tst-1 was electrotransferred into bacteria. After homologous recombination, tst-1 gene knockout strain without tst-1 gene fragment and TSST-1 protein expression was identified by Western blot, which indicated that the knockout strain of tst-1 gene of Staphylococcus aureus had been successfully constructed.
【作者单位】: 中国医科大学基础医学院免疫学教研室;中国医科大学口腔医学院口腔修复学教研室;
【基金】:辽宁省博士科研启动基金项目(20111109)
【分类号】:R378.11;Q78
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,本文编号:1894539
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