体外诱导鸡原始生殖细胞向精子分化的研究

发布时间：2018-05-21 09:49

  本文选题：鸡原始生殖细胞 + 维甲酸　； 参考：《佳木斯大学》2014年硕士论文

【摘要】：目的：建立鸡原始生殖细胞体外培养细胞系，体外诱导原始生殖细胞向精子分化，为干细胞研究应用于临床不育症，提供基础理论依据。 方法：通过鸡原始生殖细胞的体外培养，利用维甲酸体外诱导鸡原始生殖细胞向精子分化，运用RT-PCR技术、免疫荧光技术、流式细胞术、类胚体及畸胎瘤的制备等细胞分子生物学技术手段，，对鸡原始生殖细胞及诱导出的精子的生物学特性展开研究。 结果：建立了稳定的鸡原始生殖细胞体外培养细胞系；分析了鸡原始生殖细胞的分子生物学特性；制备了具有自主节律性收缩，最大直径约440μm的类胚体；建立了畸胎瘤雏鸡模型；成功获得了具有运动能力的精子。 结论：利用鸡原始生殖细胞成功诱导出有运动能力精子的研究，为干细胞向精子诱导的机理研究，提供可靠的实验动物模型以及技术方法，能够为干细胞向精子诱导应用于临床研究提供有力的佐证材料，为临床上无数弱精症、少精症等不育患者带来新的希望。
[Abstract]:Objective: to establish a culture cell line of chicken primordial germ cells in vitro, and to induce the differentiation of primordial germ cells into spermatozoa in vitro, and to provide basic theoretical basis for the application of stem cells in clinical infertility. Methods: chicken primordial germ cells were cultured in vitro, and spermatozoa differentiation was induced by retinoic acid in vitro. RT-PCR technique, immunofluorescence technique and flow cytometry were used to induce the differentiation of chicken primordial germ cells into spermatozoa. The biological characteristics of chicken primordial germ cells and induced spermatozoa were studied by means of cell molecular biological techniques such as the preparation of embryoid bodies and teratoma. Results: a stable chicken primordial germ cell culture cell line in vitro was established, the molecular biological characteristics of chicken primordial germ cells were analyzed, and the embryoid bodies with an autonomous rhythmic contraction with a maximum diameter of 440 渭 m were prepared. The teratoma chicken model was established and the motility spermatozoa was obtained successfully. Conclusion: the study of inducing motility spermatozoa from chicken primordial germ cells provides a reliable experimental animal model and technical method for the study of the mechanism of inducing stem cells to spermatozoa. It can provide strong supporting materials for the application of stem cells to the clinical study of spermatozoa induction, and bring new hope for countless infertile patients such as oligozoospermia and oligozoospermia.
【学位授予单位】：佳木斯大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R321.1

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本文编号：1918709