阴道毛滴虫核酶嵌合型病毒载体FRzS的构建

发布时间：2018-05-28 11:53

  本文选题：阴道毛滴虫 + 病毒载体　； 参考：《吉林大学》2009年硕士论文

【摘要】： 本研究用肝浸汤培养基对阴道毛滴虫携病毒株进行了体外纯培养;将包含两个铁氧化还原蛋白短臂的锤头状核酶插入到阴道毛滴虫病毒稳定转染载体pTVV289/NEO+MCS/TVV174中,构建了核酶嵌合型阴道毛滴虫病毒载体FRzS(为短反义序列,上游24nts,下游19nts);经体外转录电穿孔的方法转染到阴道毛滴虫体内,通过虫体计数、光学显微镜观察的方法观察其对虫体的影响。结果显示,阴道毛滴虫滋养体在转染后4d内,转染虫体数量显著低于正常对照组(P0.01);显微镜观察显示转染虫体变形。表明核酶嵌合型阴道毛滴虫病毒载体FRzS对虫体的生长、细胞形态均有显著影响。本试验成功构建了阴道毛滴虫核酶嵌合型病毒载体FRzS,为进一步研究Fd蛋白在阴道毛滴虫体内的生理功能提供了途径,为阴道毛滴虫病毒载体在毛滴虫细胞生物进化和分子生物学等研究中的应用奠定了基础。
[Abstract]:In this study, Trichomonas vaginalis carrying virus strain was cultured in vitro on liver-immersed decoction medium, and hammerhead ribozyme containing two iron redox protein short arms was inserted into the stable transfection vector pTVV289/NEO MCS/TVV174 of Trichomonas vaginalis virus. A ribozyme chimeric Trichomonas vaginalis virus vector FRzSwas constructed, which was transfected into Trichomonas vaginalis by electroporation in vitro. The effect of optical microscope on insect body was observed. The results showed that the number of trophozoites of Trichomonas vaginalis was significantly lower than that of the control group within 4 days after transfection, and the deformation of the transfected trophozoites was observed by microscope. The results showed that ribozyme chimeric trichomonas vaginalis virus vector FRzS had a significant effect on the growth and cell morphology of the parasite. In this study, we successfully constructed the vector FRzS of Trichomonas vaginalis ribozyme, which provided a way to further study the physiological function of FD protein in Trichomonas vaginalis. The results laid a foundation for the application of Trichomonas vaginalis virus vector in Trichomonas vaginalis cell biological evolution and molecular biology.
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R382.21

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本文编号：1946604