小鼠α4b干扰素报告基因的构建及其真核表达的探索

发布时间：2018-07-16 10:15

【摘要】： 干扰素(Interferon, IFN)是人和动物的干扰素产生细胞如B细胞、单核细胞、自然杀伤细胞和树突状细胞,成纤维细胞等在病毒、细菌、合成的核苷酸以及其它一些小分子等的刺激下产生的微量的高生物学活性的糖蛋白。其中α4b干扰素(IFN-α4b)是干扰素产生的途径中最早产生并且经过Ⅰ型干扰素的正反馈途径,产生量最多的α干扰素亚型。 CpG ODN是以非甲基化的胞嘧啶和鸟嘌呤核苷酸(CpG)为核心的寡聚脱氧核苷酸,对免疫系统有刺激性效应,是干扰素的诱生剂之一;而抑制性ODN(免疫抑制性寡核苷酸)可以抑制干扰素的产生或降低干扰素的产量。干扰素诱生剂通过TLR途径或核酸结合蛋白途径活化干扰素启动子的转录因子IRF-7等,活化的转录因子和干扰素启动子结合启动干扰素的转录。 本研究的主要目的是基于干扰素产生的通路,构建一个筛选ODN的实验平台。首先通过分子克隆实验构建了序列正确的小鼠α4b干扰素的真核报告基因pcDNA3/PmIFN-α4b-GFP;之后利用重组真核表达质粒pcDNA3-GFP,通过优化的脂质体细胞转染法转染L929细胞,建立了高效的外源重组表达质粒转染小鼠成纤维细胞的转染平台,为以后建立筛选ODN实验平台奠定了基础。
[Abstract]:A small amount of highly bioactive glycoprotein produced by the stimulation of synthetic nucleotides and other small molecules. Inhibitory ODN (immunosuppressive oligonucleotide) can inhibit the production of interferon or reduce the production of interferon. The aim of this study was to construct a platform for screening ODN based on interferon-producing pathway. A high efficient transfection platform of exogenous recombinant expression plasmid for transfection of mouse fibroblasts was established, which laid a foundation for the establishment of the experimental platform for screening ODN in the future.
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R392

【共引文献】

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本文编号：2126068