低氧对人骨髓间充质干细胞增殖及血红素加氧酶-1表达的的影响

发布时间：2018-07-21 14:04

【摘要】： 目的：探讨低氧对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)增殖及血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响。 方法：密度梯度离心法分离、培养健康供者的单个核细胞；用流式细胞仪检测hBMSCs中CD13、CD34、CD44、CD45、CD71、HLA-DR的表达；用CoCl2建立化学低氧模型,MTT法和流式细胞术检测人骨髓间充质干细胞在低氧条件下的增殖；通过实时荧光定量PCR及流式细胞仪分别检测低氧下血红素氧合酶-1mRNA及蛋白表达的量-效和时-效关系。 结果：流式细胞术检测MSCs细胞表面抗原结果显示高表达CD13、CD44、CD71,而CD34、CD45、HLA-DR表达阴性。CoCl2模拟的化学性低氧促进了间充质干细胞的增殖,并且这种促增殖作用具有一定的时间及浓度依赖性。实时定量结果与流式细胞仪测得的结果相似：低氧促进了人骨髓间充质干细胞中HO-1的表达,并且这种表达呈现出较好的剂量和时间依赖性。 结论：CoCl2诱导慢性低氧促进人骨髓间充质干细胞增殖并可诱导人骨髓间充质干细胞中血红素加氧酶-1的表达,并且低氧促进人骨髓间充质干细胞的增殖与血红素加氧酶-1表达间有一定的剂量和时间依赖性。
[Abstract]:Objective : To investigate the effect of hypoxia on the proliferation of human bone marrow mesenchymal stem cells ( hMSCs ) and the expression of heme oxygenase - 1 ( HO - 1 ) .



Methods : Density gradient centrifugation was used to separate mononuclear cells from healthy donors .
The expression of CD13 , CD34 , CD44 , cd45 , CD71 and HLA - DR in hMSCs was detected by flow cytometry .
Using CoCl2 to establish a chemical hypoxia model , MTT assay and flow cytometry were used to detect the proliferation of human bone marrow mesenchymal stem cells under hypoxia .
Quantitative - effect and time - effect relationship of heme oxygenase - 1 mRNA and protein expression in hypoxia were detected by real - time fluorescence quantitative PCR and flow cytometry .



Results : The results of flow cytometry showed that CD13 , CD44 and CD71 were highly expressed in the surface antigen of MSCs . The results showed that hypoxia promoted the expression of HO - 1 in human bone marrow mesenchymal stem cells and showed a good dose and time dependence .



Conclusion : CoCl2 induces chronic hypoxia to promote the proliferation of human bone marrow mesenchymal stem cells and induce the expression of heme oxygenase - 1 in human bone marrow mesenchymal stem cells , and hypoxia promotes the proliferation of human bone marrow mesenchymal stem cells and the expression of heme oxygenase - 1 .
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R329

【共引文献】

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本文编号：2135766