SD大鼠食物过敏动物模型建立及其消化系统超微结构变化

发布时间：2018-08-03 11:05

【摘要】：目的探讨SD大鼠食物过敏动物模型建立的适宜条件及该模型消化系统超微结构的改变。方法 30只SD大鼠随机分为食物过敏组(20只),生理盐水组(10只)。食物过敏组第1天及第15天以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)低剂量腹腔注射进行基础致敏及强化致敏;第20天起以OVA进行高剂量隔日灌胃激发至第49天;对照组分别以等量生理盐水进行腹腔注射及灌胃。分别于1、2、3、4、5、6和7周采用酶联免疫吸附试验检测血清OVA-Ig E抗体水平,同时观察大鼠腹泻情况。第6周后处死动物,取其十二指肠Treitz韧带以下5 cm,经固定、包埋、切片,甲苯胺兰染色行肥大细胞完整性评估,HE染色下观察肠道病理变化,电镜观察肠黏膜超微结构。结果食物过敏组OVA-Ig E水平在第4~6周逐渐升高,第7周下降,与对照组相比差异有统计学意义(P0.01)。第6周食物过敏组大鼠均出现腹泻。食物过敏组与对照组肠黏膜嗜酸粒细胞密度[(16.48±2.32)个湓HPF vs.(1.70±0.42)个湓HPF]、肥大细胞数总数[(9.02±1.55)个湓HPF vs.(1.84±0.87)个湓HPF]和完整性百分率[(36.50%±12.54%)vs.(92.20%±6.87%)]比较,差异有统计学意义(均P0.01)。电镜和光镜下观察,食物过敏组动物小肠绒毛稀疏、脱落,细胞连接模糊,线粒体广泛肿胀,内质网扩张,内质网脱颗粒。结论采用SD大鼠通过低剂量腹腔注射与高剂量灌胃激发至6周可成功建立理想食物过敏动物模型,卵清蛋白致敏大鼠小肠肠黏膜损伤明显,细胞连接模糊,可能在食物过敏发病机制中起重要作用。
[Abstract]:Objective to investigate the suitable conditions for establishing the animal model of food allergy in SD rats and the changes of the ultrastructure of digestive system in the model. Methods Thirty SD rats were randomly divided into food allergy group (n = 20) and saline group (n = 10). In the food allergy group, ovalbumin OVA (ovalbumin OVA) was injected intraperitoneally at low dose on the 1st and 15th day for basal sensitization and enhanced sensitization, and high dose OVA was administered to the stomach every other day until the 49th day from the 20th day. The control group received intraperitoneal injection and intragastric administration of the same amount of normal saline. The level of serum OVA-Ig E antibody was detected by enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa) at 1, 2, 3, 4, 5, 5, and 7 weeks, respectively, and the diarrhea in rats was observed at the same time. After 6 weeks, the animals were killed, and the duodenal Treitz ligaments were taken under 5 cm, fixed, embedded, sectioned and stained with toluidine blue to evaluate the integrity of mast cells. The intestinal pathological changes were evaluated by HE staining, and the ultrastructure of intestinal mucosa was observed by electron microscope. Results the level of OVA-Ig E in the food allergy group increased gradually at the 4th week and decreased at the 7th week, which was significantly different from that in the control group (P0.01). Diarrhea was found in all the rats in the food allergy group at the 6th week. There were significant differences in eosinophil density (16.48 卤2.32) HPF vs. (1.70 卤0.42 HPF), mast cell count (9.02 卤1.55) HPF vs. (1.84 卤0.87) and integrity percentage (36.50% 卤12.54%) vs. (92.20% 卤6.87%) between food allergy group and control group (all P0.01). Under electron microscope and light microscope, the intestinal villi of food allergy group were sparse, shedding, cell connection blurred, mitochondria swelling, endoplasmic reticulum dilatation, endoplasmic reticulum degranulation. Conclusion the ideal animal model of food hypersensitivity can be established successfully by low dose intraperitoneal injection and high dose gastric perfusion for 6 weeks in SD rats. Ovalbumin sensitized rats have obvious intestinal mucosal damage and blurred cell connections. It may play an important role in the pathogenesis of food allergy.
【作者单位】： 温州医科大学附属育英儿童医院消化内科;温州市中西医结合医院超声科;
【基金】：卫生部国家临床重点专科开放课题(20130109) 温州市科学技术局科技计划项目(Y20140062)
【分类号】：R725.9;R-332

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