氯化钴和脂多糖对巨噬细胞RAW264.7表达HIF-1α和TGF-β1的影响

发布时间：2018-08-13 16:57

【摘要】： 目的:研究氯化钴、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对巨噬细胞缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)与转化生长因子-β1(transforming growth factor -β1,TGF-β1)表达的影响及机制。 方法:将巨噬细胞RAW264.7分为LPS(1μg/ml)刺激组、CoCl2(100μmol/L)刺激组、CoCl2作用(100μmol/L)后LPS(1μg/ml)刺激组、正常对照组(给予等量PBS)。采用RT-PCR法检测各组HIF-1α、VEGF和TGF-β1 mRNA的表达水平,免疫细胞化学染色检测各组HIF-1α、VEGF和TGF-β1蛋白的表达水平。 结果: (1)与正常对照组细胞相比,CoCl2组及CoCl2作用后LPS刺激组细胞HIF-1αmRNA表达水平增加(P0.05),LPS刺激组、CoCl2组、CoCl2作用后LPS刺激组细胞VEGF mRNA及蛋白、HIF-1α蛋白表达水平均增加(P0.05);与LPS刺激组比较,CoCl2组细胞HIF-1αmRNA表达水平增加(P0.05),CoCl2作用后LPS刺激组细胞HIF-1α、VEGF的mRNA与蛋白表达水平增加(P0.05);与CoCl2组比较,CoCl2作用后LPS刺激组细胞VEGF mRNA及蛋白、HIF-1α蛋白表达水平增加(P0.05)。(2)与正常对照组细胞比较,LPS刺激组细胞TGF-β1 mRNA与蛋白表达水平均减少(P0.05),CoCl2组细胞TGF-β1 mRNA与蛋白表达水平均增加(P0.05),而CoCl2作用后LPS刺激组细胞TGF-β1 mRNA与蛋白表达水平未见明显改变(P0.05)。 结论:常氧条件下,LPS可在转录水平下调巨噬细胞TGF-β1的表达; CoCl2诱导的低氧条件可使巨噬细胞HIF-1α、VEGF及TGF-β1 mRNA与蛋白的表达水平均增加,低氧诱导合并LPS刺激可使巨噬细胞表达HIF-1α及VEGF的mRNA与蛋白的水平均显著增加,而TGF-β1的表达水平无明显变化。提示巨噬细胞在常氧与低氧环境下对LPS刺激的反应存在一定的差异,这种差异可能影响相关疾病的发生发展。
[Abstract]:AIM: To study the effects of cobalt chloride and lipopolysaccharide (LPS) on the expression of hypoxia inducible factor-1 alpha (HIF-1 alpha) and transforming growth factor-beta 1 (TGF-beta 1) in macrophages.
METHODS: Macrophages RAW264.7 were divided into LPS (1 ug/ml) stimulation group, CoCl 2 (100 ugol/L) stimulation group, LPS (1 ug/ml) stimulation group after CoCl 2 (100 ugol/L) stimulation, and normal control group (given the same amount of PBS). The expression level of white.
Results: (1) Compared with the normal control group, the expression of HIF-1 alpha mRNA increased (P 0.05) in LPS-stimulated group, LPS-stimulated group, CoCl2-stimulated group, and LPS-stimulated group (P 0.05), and the expression of VEGF mRNA and protein, HIF-1 alpha protein in LPS-stimulated group increased (P 0.05). In addition (P 0.05), the expression levels of HIF-1a, VEGF mRNA and protein in LPS-stimulated cells were increased (P 0.05) and that in LPS-stimulated cells were increased (P 0.05). Compared with CoCl2 group, the expression levels of VEGF mRNA and protein and HIF-1a protein in LPS-stimulated cells were increased (P 0.05). (2) Compared with normal control cells, the expression levels of TGF-beta 1 mRNA and protein in LPS-stimulated cells were decreased. (P 0.05), the expression of TGF-beta 1 mRNA and protein increased in CoCl2 group (P 0.05), but the expression of TGF-beta 1 mRNA and protein did not change significantly in LPS-stimulated group (P 0.05).
CONCLUSION: LPS can down-regulate the expression of TGF-beta 1 in macrophages at transcriptional level under normoxic conditions; CoCl2-induced hypoxia can increase the expression levels of HIF-1a, VEGF and TGF-beta 1 mRNA and protein in macrophages. Hypoxia-induced combined with LPS stimulation can significantly increase the expression levels of HIF-1a and VEGF mRNA and protein in macrophages, while TGF-beta can increase significantly. There was no significant change in the expression of beta-1, suggesting that there was a certain difference in the response of macrophages to LPS stimulation in normoxic and hypoxic environments, which may affect the occurrence and development of related diseases.
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R364.5

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 李嵘;沈颖;张金黎;罗惠民;周艳;陈飞;谢瑜;;蛋白激酶Cβ抑制剂LY333531对小鼠阿霉素肾病血管内皮生长因子表达的影响[J];广东医学;2011年08期

2 金丽琴;陈秀芳;吕建新;刘明达;陈柏坤;钱松;;花色素苷诱导小鼠巨噬细胞一氧化氮生成及其机制[J];中国生化药物杂志;2011年04期

3 杨淳;田维毅;;防风多糖对巨噬细胞分泌细胞因子的影响[J];贵阳中医学院学报;2011年04期

4 缪明远;牛轶雯;陆树良;;巨噬细胞活化与创面愈合[J];上海交通大学学报(医学版);2011年08期

5 朱建飞;唐春红;吴谋成;;菜籽多糖WPS-1对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响[J];中国粮油学报;2011年08期

6 李蕾;李海山;宋乃宁;陈会明;;邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞吞噬能力的影响研究[J];中国免疫学杂志;2011年09期

7 吕宁;;小鼠腹腔吞噬实验技术[J];现代养生;2011年14期

8 崔淑华;庹勤慧;;动脉粥样硬化中巨噬细胞凋亡与内质网应激机制[J];国际病理科学与临床杂志;2011年04期

9 邹兵兵;朱立新;耿小平;;CR3和FcR在肝细胞癌中的分布特征[J];安徽医科大学学报;2011年08期

10 潘欣;蔡家麟;李广波;李晗;陈龙;吴鉴今;;TassC结合过氧化物酶体对早期受染巨噬细胞内的鼠伤寒沙门菌的影响[J];微生物学杂志;2011年03期

相关会议论文 前10条

1 柴婵娟;杨志明;康玉明;肖传实;;核因子-κB信号途径介导血管紧张素Ⅱ诱导THP-1巨噬细胞基质金属蛋白酶-9的表达[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年

2 吴南屏;常秀春;姚航平;李丹;冯磊;;RANTES蛋白对SARS病毒感染巨噬细胞的抑制效应及机制[A];2006年浙江省感染病、肝病学术会议论文汇编[C];2006年

3 梁华平;韩健;吴丹;徐祥;王正国;;创伤小鼠腹腔巨噬细胞自噬活性降低[A];全国危重病急救医学学术会议论文汇编[C];2007年

4 尤胜义;寇丽;费乃昕;马春蕾;;重症急性胰腺炎大鼠脾脏巨噬细胞Toll样受体4的表达与内毒素耐受[A];中华医学会第十一届全国胰腺外科学术研讨会论文汇编[C];2006年

5 刘星光;姚鸣;李楠;王春梅;郑媛媛;曹雪涛;;钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ通过结合并活化TAK1和IRF3加强巨噬细胞中TLR配体诱导的炎症因子和Ⅰ型干扰素的产生[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年

6 张伟;周寿红;凌宏艳;姚起鑫;亓竹青;胡弼;;槟榔碱抑制氧化性低密度脂蛋白刺激巨噬细胞炎症因子的表达及其机制的初步探讨[A];湖南省生理科学会2008年度学术年会论文摘要汇编[C];2008年

7 陈均法;郑智茵;孔英;郭艳荣;沈建平;叶宝东;林筱洁;高瑞兰;周郁鸿;;硼替佐米对THP-1源性巨噬细胞抗原提呈能力的影响[A];2011年浙江省血液病学术年会暨浙江省医学会血液病学分会成立50周年庆典论文汇编[C];2011年

8 杨晓彤;任文智;马伟超;杨明俊;糜可;冯慧琴;杨庆尧;;云芝糖肽(PSP)对小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞的双向免疫调节作用[A];中国菌物学会2009学术年会论文摘要集[C];2009年

9 张玲;江远;何金洋;郭兴伯;;铁沉积于巨噬细胞对TGF-β_1、iNOS、TNF-α mRNA表达的影响[A];中华中医药学会全国第十四次肝胆病学术会议论文汇编[C];2010年

10 周勇;夏泠;周亚娟;何忠时;谢丛华;;电离辐射对RAW264.7细胞系MMP-9基因表达的影响[A];湖北省抗癌协会青年委员会成立大会暨第一届青年学术论坛资料汇编[C];2009年

相关重要报纸文章 前10条

1 兰克;以尝试用巨噬细胞治瘫痪[N];科技日报;2000年

2 唐颖 倪兵 陈代杰;巨噬细胞泡沫化抑制剂研究快步进行[N];中国医药报;2006年

3 李军;欧盟发布第一批高关注物质候选清单[N];现代物流报;2008年

4 张中桥;白藜芦醇可抑制巨噬细胞释放细胞因子[N];中国中医药报;2007年

5 ;钴补充饲料[N];中国畜牧兽医报;2008年

6 ;以临床实验治疗瘫痪新法[N];中国医药报;2000年

7 侯嘉 何新乡;硒的神奇功能[N];中国食品质量报;2003年

8 卢苏燕;艾滋病毒怎样钻进免疫“肚子”[N];新华每日电讯;2007年

9 卢苏燕;HIV破坏免疫系统机制被揭示[N];医药经济报;2007年

10 本报记者 杨珂;了解我们的体内“卫士”——免疫系统[N];中国消费者报;2001年

相关博士学位论文 前10条

1 章宏;1.人巨噬细胞金属弹性蛋白酶在胃癌细胞及胃癌组织中的表达及临床意义　2.胃癌和结肠癌患者二氢嘧啶脱氢酶基因多态性与5-FU代谢及临床意义探索[D];浙江大学;2006年

2 王玉珍;溶酶体相关的小G蛋白Rab7b负向调节巨噬细胞Toll样受体信号转导的研究[D];浙江大学;2006年

3 杨洋;DcR3干预肺纤维化动物模型及其转染人成纤维细胞的实验研究[D];吉林大学;2009年

4 马翠卿;GAS下调巨噬细胞炎症因子的作用及机制研究[D];河北医科大学;2011年

5 鞠瑞;羧胺三唑的抗癌新机制抑制肿瘤相关巨噬细胞中促炎细胞因子的释放[D];北京协和医学院;2011年

6 尚Z腪，

本文编号：2181606