重组质粒pEGFP-N1-apoJ的构建及在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达

发布时间：2018-08-23 19:51

【摘要】：目的体外构建重组质粒pEGFP-N1-apoJ,转染大鼠骨髓间充质干细胞,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达。方法通过脂质体介导重组质粒pEGFP-N1-apoJ转染大鼠骨髓间充质干细胞,确定转染效率,并通过Real-time PCR、免疫细胞化学法、Western blot法检测载脂蛋白-J(apoJ)的表达。结果增强型绿色荧光蛋白在大鼠骨髓间充质干细胞中瞬时转染效率达35%。转染后Real-time PCR、免疫细胞化学法和Western blot法检测证实重组质粒pEGFP-N1-apoJ在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达。结论重组质粒p EGFPN1-apoJ成功转染大鼠骨髓间充质干细胞,并在大鼠骨髓间充质干细胞中得到表达,有助于应用apoJ行基因治疗,为进一步研究apoJ作为新的脑出血治疗措施奠定实验基础。
[Abstract]:Aim to construct a recombinant plasmid pEGFP-N1-apoJ, to transfect rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) and detect its expression in rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs). Methods Rat bone marrow mesenchymal stem cells were transfected with recombinant plasmid pEGFP-N1-apoJ mediated by liposome and the transfection efficiency was determined. The expression of apolipoprotein -J (apoJ) was detected by Real-time PCR, immunocytochemistry and Western blot. Results the transient transfection efficiency of enhanced green fluorescent protein in rat bone marrow mesenchymal stem cells was 35%. The expression of recombinant plasmid pEGFP-N1-apoJ in rat bone marrow mesenchymal stem cells was confirmed by Real-time PCR, immunocytochemistry and Western blot assay. Conclusion the recombinant plasmid p EGFPN1-apoJ was successfully transfected into rat bone marrow mesenchymal stem cells and expressed in rat bone marrow mesenchymal stem cells, which was helpful for gene therapy with apoJ. To further study apoJ as a new treatment of intracerebral hemorrhage to lay the experimental foundation.
【作者单位】： 四川医科大学附属第一医院神经外科;四川医科大学附属第一医院神经内科;
【基金】：四川省卫生厅课题基金(No:110597)
【分类号】：R329

【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：2199739