REGgamma的生理和病理研究

发布时间：2018-10-19 20:24

【摘要】： 蛋白酶体是蛋白质降解途径中的一种重要成分。蛋白酶体降解途径对于许多细胞进程,包括细胞周期、转录调控、细胞信号传导、细胞凋亡及免疫反应等都是必不可少的。其功能改变将引起蛋白代谢异常,导致细胞功能紊乱。REG是一种蛋白酶体激活因子,它能特异性结合并活化20S蛋白酶体,以ATP和泛素非依赖途径降解目的蛋白。目前发现此家族有三个成员：即REGa.REGβ和REGγ。REGγ是由7个28KD的亚基形成的同源七聚体,能激活蛋白酶体的活性。癌症是目前人类的头号杀手,而大肠癌、肺癌及甲状腺癌是目前癌症死因的几种重要类型。癌症的发病机理很复杂,但究其原因主要在于细胞周期失控和细胞恶性增长。之前研究显示：p53是细胞内重要的抑癌基因,它也是细胞增殖、分化和凋亡的一个枢纽,p53突变或者降解都会导致其功能失调,使细胞及其后代的基因组受到严重损害,引发恶性肿瘤。p21是p53下游的靶基因,它和p53共同构成细胞周期G1期的检查站,DNA损伤后不经过修复则无法通过,减少受损DNA的复制和积累,从而发挥抑癌作用。p21是细胞周期抑制蛋白,可导致细胞生长停滞,促进细胞凋亡。而本实验室目前研究发现：REGγ能促进MDM2介导的P53降解,而且REGγ能介导蛋白酶体对p21的降解。由此表明,REGγ与癌症的发生发展密切相关。但是至今为止,REGγ在癌症发生发展中的具体机制还不是非常清楚。因此,本文我们采用9种小鼠组织、两种人正常组织和三种典型的人类癌症组织作为研究对象,来探讨REGγ在各种正常组织和癌症组织中的表达和分布情况,并且探究其作用机理。本文的研究能够为以后癌症的治疗提供理论依据。本文主要采用免疫组织化学的方法,对REGγ在9种小鼠组织的表达分布进行系统研究,同时通过比较REGγ在大肠癌、肺癌及甲状腺癌中和正常人组织中的表达差异,揭示REGγ在大肠癌、肺癌及甲状腺癌的发生发展中的作用。最后,本文还用免疫组化的方法检测了REGγ+/+和REGγ-/-小鼠组织中p53、p21和MDM2的分布,并和REGγ的表达做相关性分析,初步探索REGγ的作用机理。另外,我们还采用荧光素酶方法,通过体外实验探讨了REGγ可能的作用机制。结果发现,在正常的生理分布方面,REGγ在小鼠的神经系统、泌尿系统、消化系统、生殖系统及内分泌系统中均呈现阳性表达。其中神经系统和生殖系统阳性表达率最高。特别是小脑的浦肯野细胞和视网膜的神经节细胞中发现有特异表达。这提示REGγ可能参与细胞的生长及细胞周期的调控。同时,相对于正常癌旁组织,REGγ在大肠癌,肺癌和甲状腺癌组织中呈现明显的高表达。所以REGγ可能与肿瘤的发生发展相关。在进一步的机理探究中,我们通过比较REGγ+/+和REGγ-/-小鼠中p53、p21、MDM2的表达差异,发现REGγ能够减少各种小鼠组织中细胞周期调节蛋白p53和p21的表达,促进MDM2蛋白的表达。因此我们推测：REGγ对癌症的作用可能是通过降解p53或p21的降解来实现,其具体机制还需要进一步的探索。抑制人类癌细胞的内源性REGγ蛋白就能够减少MDM2介导的p53降解,从而促进肿瘤细胞凋亡,因此REGγ有望于成为癌症治疗的一个新的靶蛋白。
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【学位授予单位】：华东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R341;R73-3

【参考文献】