rhEPO预处理对低氧损伤胶质细胞MMP-9表达的影响

发布时间：2018-10-25 18:48

【摘要】： 目的探讨人促红细胞生成素(rhEPO)对低氧损伤胶质细胞的影响及对基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响 方法通过体外纯化培养第3代星形胶质细胞,将其分为正常组、低氧组、rhEPO预处理组;以四唑蓝(MTT)比色法测定低氧培养12h、24h、36h细胞的存活率,倒置显微镜和透射电镜观察低氧对胶质细胞形态的影响;免疫荧光和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法研究低氧对星形胶质细胞MMP-9表达的影响。 结果 1、低氧组星形胶质细胞在低氧培养下出现细胞肿胀,且随时间的延长而加重,rhEPO预处理组在各个时间点细胞肿胀明显轻于低氧组。 2、rhEPO能减轻细胞超微结构的改变及降低MTT比值。 3、RT-PCR及免疫荧光检测:低氧组MMP-9 mRNA及蛋白的表达在低氧各个时间点均高于正常组,在24h达到最高,在36h开始降低(P0.05) 4、rhEPO预处理组MMP-9mRNA及蛋白的表达变化在12h、24h、36h较低氧组低(P0.05) 结论rhEPO通过抑制MMP-9的表达促进低氧条件下星形胶质细胞的存活。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of human erythropoietin (rhEPO) on the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in hypoxic injured glial cells. They were divided into normal group, hypoxia group and rhEPO pretreatment group. The survival rate of cultured cells was determined by (MTT) colorimetry. The morphology of glial cells was observed by inverted microscope and transmission electron microscope (TEM). The effects of hypoxia on MMP-9 expression in astrocytes were studied by immunofluorescence and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results 1. The astrocytes of hypoxic group showed swelling in hypoxia culture, which was aggravated with the prolongation of time. The swelling of astrocytes in rhEPO pretreatment group was lighter than that in hypoxic group at each time point. 2rhEPO can reduce the ultrastructural changes and MTT ratio. 3RT-PCR and immunofluorescence detection: the expression of MMP-9 mRNA and protein in hypoxia group was higher than that in normal group at all time points, reached the highest level at 24 h, and decreased at 36 h (P0.05). The expression of MMP-9mRNA and protein in rhEPO pretreatment group was lower than that in hypoxic group at 12h, 24h and 36h (P0.05). Conclusion rhEPO can promote the survival of astrocytes in hypoxic condition by inhibiting the expression of MMP-9.
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R363

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本文编号：2294520