Apical bud上皮诱导脂肪间充质干细胞向成牙本质样细胞分化的研究

发布时间：2018-11-20 05:21

【摘要】：目的:通过体外及体内实验探讨大鼠切牙Apical bud上皮细胞诱导大鼠脂肪来源间充质干细胞向成牙本质细胞分化的能力。方法:分离培养大鼠脂肪间充质干细胞、Apical bud上皮细胞,制备Apical bud上皮条件诱导液并体外对ADSCs诱导7d,通过实时定量PCR方法检测成牙本质关键基因DMP-1及DSPP的表达。制备ADSCs及Apical bud上皮重组细胞团进行大鼠肾被膜下移植,8W后取材,分别采用HE染色、Masson三色法和免疫组化方法对移植生成物进行组织学检测。结果:Apical bud上皮诱导ADSCs后DMP-1及DSPP m R NA表达水平显著高于对照组。体内移植8W后H E染色可见管样牙本质和骨样牙本质样结构,Masson三色法可以观察到有绿色的牙本质样结构,免疫组化检测中CK14染色阳性,DSPP染色阳性。结论:Apical bud上皮细胞在体外能够诱导ADSCs向成牙本质细胞分化,且细胞重组在体内可以构建出牙本质样结构。
[Abstract]:Aim: to investigate the differentiation of rat adipose derived mesenchymal stem cells into odontoblast cells induced by rat incisor Apical bud epithelial cells in vitro and in vivo. Methods:, Apical bud epithelial cells from rat adipose mesenchymal stem cells were isolated and cultured. Apical bud conditioned medium was prepared and ADSCs was induced in vitro for 7 days. The expression of DMP-1 and DSPP was detected by real-time quantitative PCR. ADSCs and Apical bud epithelial recombinant cell clusters were prepared for submembrane transplantation of rat kidney. After 8 weeks of transplantation, the transplanted products were detected by HE staining, Masson trichrome method and immunohistochemical method respectively. Results the expression of DMP-1 and DSPP m R NA in ADSCs induced by: Apical bud epithelium was significantly higher than that in control group. After 8 weeks of transplantation, the tubular and bone-like dentin structures could be observed by H E staining. Green dentin-like structures could be observed by Masson trichrome. CK14 staining and DSPP staining were positive in immunohistochemistry. Conclusion: Apical bud epithelial cells can induce ADSCs to differentiate into odontoblast in vitro, and dentin like structure can be constructed by cell recombination in vivo.
【作者单位】： 第四军医大学口腔医院正畸科;解放军总医院口腔科;解放军总医院口腔医学研究所;解放军总医院老年口腔科;
【基金】：国家自然科学基金青年基金(项目编号:31200741) 中国博士后科学基金(项目编号:2013M532108) 北京市科技新星计划(项目编号:Z14144000180000)
【分类号】：R329.2

【参考文献】

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【二级参考文献】

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