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A群轮状病毒TaqMan RT-PCR检测方法的建立

发布时间:2018-12-17 22:10
【摘要】:目的建立以特异性荧光探针为特点的Taqman荧光定量RT-PCR方法,对轮状病毒A群核酸进行检测。方法根据轮状病毒A群基因组保守序列设计引物和探针,建立并分析TaqMan RT-PCR的重复性、特异性、敏感性;以所建立的方法对128例病毒性腹泻患者粪便标本进行检测,同时以基因测序进行验证。结果所建立的TaqMan RT-PCR检测方法对轮状病毒A群具有很好的特异性和重复性,灵敏度达到101拷贝/μl。128例粪便标本中,轮状病毒A群的检出率为18.0%,与基因测序比对结果相符。结论构建的轮状病毒A群TaqMan RT-PCR检测方法快速、特异且灵敏,可用于临床病原诊断和流行病学调查。
[Abstract]:Objective to establish a Taqman fluorescence quantitative RT-PCR method based on specific fluorescence probe to detect rotavirus group A nucleic acid. Methods Primer and probe were designed according to the conserved sequence of rotavirus A genome to establish and analyze the repeatability, specificity and sensitivity of TaqMan RT-PCR. The fecal specimens of 128 patients with viral diarrhea were detected by the established method and verified by gene sequencing. Results the TaqMan RT-PCR method was specific and reproducible to rotavirus group A, and the sensitivity reached 101 copies / 渭 l.128 fecal specimens. The detection rate of rotavirus group A was 18.0%. The results were consistent with the results of gene sequencing. Conclusion the constructed method for detecting rotavirus group A TaqMan RT-PCR is rapid, specific and sensitive, and can be used for clinical diagnosis and epidemiological investigation.
【作者单位】: 湖州市疾病预防控制中心;
【基金】:湖州市科技计划项目(2013GY15)
【分类号】:R373

【参考文献】

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1 曾军荣;李榕娇;陈永强;邝炽庄;孙慧冰;;常见腹泻病毒多重荧光逆转录聚合酶链反应检测方法的建立及临床应用[J];国际检验医学杂志;2011年13期

2 卫海燕;黄学勇;许玉玲;马宏;陈豪敏;许汴利;;EV71病毒核酸快速检测方法的比较[J];病毒学报;2012年06期

3 许东亮;聂晓晶;张国成;钱新宏;杨晓蕾;邓军霞;李玲莉;;实时荧光定量PCR快速诊断肠道病毒71型感染[J];中华实用诊断与治疗杂志;2012年12期

【共引文献】

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3 农学圣;;新生儿肠道病毒感染的诊疗现状[J];大家健康(学术版);2013年07期

4 王和平;郑跃杰;陈小文;邓继岿;张民;刘萍;林遂香;;直接免疫荧光与实时荧光定量反转录PCR检测常见呼吸道病毒抗原比较[J];中华实用诊断与治疗杂志;2013年10期

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6 毛莉萍;章幼奕;;肠道病毒71型病毒学及致病机制研究进展[J];中华实用诊断与治疗杂志;2014年11期

7 徐德顺;陈莉萍;朱晓娟;;应用双重实时荧光定量反转录-聚合酶链反应方法同时检测A组轮状病毒和星状病毒[J];疾病监测;2014年12期

【二级参考文献】

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4 李玉萍;马娜;;不同剂量甲基强的松龙治疗重症手足口病疗效观察[J];中华实用诊断与治疗杂志;2010年04期

5 廖国东;吴文锋;许桂锋;许铭清;陈家图;谢建忠;罗光毅;;实时荧光PCR技术在手足口病检测中应用[J];中华实用诊断与治疗杂志;2010年11期

6 杨秀惠;严延生;陈前进;陈秋婷;谢文煌;何爱华;张红榕;;病毒性脑炎病例中肠道病毒的分析[J];海峡预防医学杂志;2008年04期

7 孙毅;靳艳;黄卫东;刘纯义;张萍;;肠道病毒脑炎39例病原学及影响其预后的相关因素分析[J];中国小儿急救医学;2006年02期

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1 王懋梁;;轮状病毒的研究进展(综述)[J];国外医学(微生物学分册);1979年01期

2 张惠芬;;人轮状病毒Ⅱ型:体外培养[J];国外医学(微生物学分册);1981年03期

3 阎沐京;任中原;;轮状病毒样因子是否为轮状病毒属中的新成员[J];国外医学.流行病学传染病学分册;1984年06期

4 吴妙灵 ,白植生 ,吴妙灵;轮状病毒酶联免疫吸附试验[J];微生物学免疫学译刊;1985年03期

5 张传安;;人轮状病毒的血凝活性[J];预防医学情报;1985年03期

6 古月;;牛奶中轮状病毒抗体[J];国外医学情报;1985年08期

7 Anna Maria Agllano ,李玉如;新的人轮状病毒株的分离[J];微生物学免疫学译刊;1986年04期

8 孙茂盛,郭仁;轮状病毒免疫有关的一些研究进展[J];中国人兽共患病杂志;1988年01期

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3 王春凤;王会岩;徐凤宇;杨文杰;毛玉杰;单晓枫;刘尚高;;猪A组轮状病毒Vp4全基因在大肠杆菌中的表达与检测[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(上)[C];2005年

4 王春凤;王会岩;徐凤宇;杨文杰;毛玉杰;单晓枫;刘尚高;;猪A组轮状病毒Vp4全基因在大肠杆菌中的表达与检测[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会论文集[C];2005年

5 王春凤;杨树宝;胡静涛;赵丹;张云龙;叶丽萍;吴庆海;刘尚高;;猪A组轮状病毒VP4全基因的克隆与序列分析[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会论文集[C];2005年

6 王春凤;于守平;高云航;姜秀云;刘尚高;;猪A组轮状病毒VP4全基因片断的克隆与序列分析[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年

7 王春凤;杨树宝;胡静涛;赵丹;张云龙;叶丽萍;吴庆海;刘尚高;;猪A组轮状病毒VP4全基因的克隆与序列分析[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(上)[C];2005年

8 刘凯军;;轮状病毒非结构蛋白NSP1与种属限制性的相关性研究[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年

9 王延东;杨少华;高运东;郭学军;杨宏军;刘晓;王长法;胡国良;仲跻峰;何洪彬;;轮状病毒VP7基因与LTB基因的融合表达[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十三次学术研讨会论文集(下册)[C];2009年

10 陈卫红;曹玉华;张智军;;轮状病毒外壳蛋白VP4修饰Fe_3O_4纳米粒子用于生物成像及药物输运的研究[A];中国化学会第28届学术年会第4分会场摘要集[C];2012年

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本文编号:2384863

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