兔VX2食管移植瘤模型的建立及食管局部靶向给药的实验研究

发布时间：2019-01-17 21:37

【摘要】： 目的:1.采用组织块移植法建立兔VX2食管移植瘤模型,通过食管钡餐造影、CT扫描及组织病理学检查,探讨食管移植瘤的成瘤率、生长特性及转移情况,为食管癌的基础研究及寻找有效治疗方法奠定基础;2.采用特制的食管靶向给药装置,观察局部应用化疗药对正常食管的损伤以及应用细胞保护剂—氨磷汀对化疗药引起食管损伤的保护作用,为减轻氨磷汀的副反应,降低患者的费用寻找新的给药途径,并为临床开展食管癌局部靶向治疗提供理论依据。方法:1.兔VX2食管移植瘤模型的建立:12只新西兰大白兔由白求恩国际和平医院医学实验动物中心提供,月龄3～4月,雌雄不限,体重2.5～4kg。兔VX2瘤苗由第四军医大学附属唐都医院张洪新教授提供。麻醉荷瘤VX2细胞株的新西兰大白兔,从兔大腿荷瘤处取出肿瘤组织,生理盐水漂洗3次,用眼科剪将肿瘤剪碎至1mm3左右的组织块备用。麻醉成功后,将兔仰卧固定于手术台上,常规消毒,切开上腹部,剥离兔腹段食管,在贲门上约3cm处逐层切开食管浆膜层及肌层,将制备好的肿瘤块植入食管粘膜下层,缝合食管肌层及外膜,关腹,术后肌注青霉素40万IU/只,连续3天。每日观察大白兔生活习性、精神状态及体重增减等情况。于接种后第7、14及21天进行钡餐造影和CT扫描检查,观察肿瘤的生长情况。接种后21天,处死兔子取标本行病理学检测。2.食管局部靶向给药的实验研究:自制食管靶向给药装置,其由上、下球囊,骨架导管及进水管道等组成。将该装置插入食管后,膨胀上、下球囊,在上、下球囊之间形成一个腔隙,然后向腔隙内灌注DDP和(或)氨磷汀药液。24只新西兰大白兔随机分为对照组、单纯DDP组和氨磷汀+DDP治疗组,每组8只。对照组:食管腔隙局部灌注生理盐水,作用50min;单纯DDP组:给药前食管腔隙局部先灌注生理盐水,预处理20 min,然后吸出生理盐水再灌注0.25mg/ml DDP药液,作用30min;联合组:给药前食管腔隙局部先灌注0.8mg/ml氨磷汀药液,预处理20min,然后吸出氨磷汀药液,再灌注0.25mg/ml DDP药液,作用30min。于给药后第6天处死兔子取标本行病理学检测。结果:1.兔食管移植瘤模型的建立:1.1一般情况:12只兔子除2只死于手术并发症(胃穿孔及误缝食管所致的梗阻)外,其余10只接种后7天,进食水及精神可,体重无明显下降,14天后兔体重开始下降,每天下降2～3%,至第21天,兔子明显消瘦,体重下降15～20%,食管造影及CT扫描示食管下段肿瘤占位,成瘤率100%。处死动物可见肿瘤位于食管下段,环绕食管生长,穿破膈肌侵入胸腔,大小为21.04±10.35cm~3(9.88cm~3～40.53cm~3),其中2只兔子有大量胸腔积液,8只肿瘤周围见多枚肿大淋巴结,3只肺表面有转移性癌结节。切开肿瘤及食管见肿瘤呈灰白色鱼肉状,已穿破食管壁,呈蕈伞型生长,肿瘤表面糜烂,4只兔子在肿瘤上形成瘘道,出现穿孔。肿瘤组织病理学检查符合低分化鳞状细胞癌。1.2食管造影情况:肿瘤接种7天后,食管造影未见异常;14天后,食管造影示食管下段管壁僵硬,一侧有轻微压迹,长度为1.51±0.46cm(0.9cm～2.3cm);21天时食管下段粘膜破坏,充盈缺损明显,长度为3.90±0.55cm(3.2 cm～4.8 cm),伴有狭窄,4只出现食管穿孔。1.3食管CT扫描:接种7天后,CT扫描示兔食管下段管壁无增厚,管径约5mm;14天见食管下段走行区局限性管壁增厚,管腔狭窄,管径增粗,最大径为1.04±0.27cm(0.7cm～1.5cm);21天时接种区食管肿瘤增大,最大径为2.28±0.34cm(1.7 cm～2.8cm),其中5例伴有少量至中等量胸腔积液。2.食管粘膜损伤情况:肉眼观,单纯DDP组灌注部位食管明显增粗、水肿,切开食管见粘膜表面有灰白色“伪膜”覆盖,粘膜糜烂、充血。联合用药组灌注部位食管轻度增粗,无“伪膜”形成,粘膜表面光滑或轻度充血。光镜下,单纯DDP组食管粘膜上皮大部或全部脱落,粘膜层水肿,粘膜下血管扩张充血,固有层、粘膜下层有大量炎细胞浸润,侵及中深肌层,炎细胞以中性粒细胞为主。联合用药组,食管粘膜上皮部分脱落,固有层、粘膜下层有中量炎细胞浸润,肌层少见炎细胞浸润。结论:1.采用组织块移植法建立兔VX2食管癌模型具有周期短,成瘤率高,生长迅速等特点,其生物学特性与人类食管癌相似,为食管癌的基础研究及寻找有效治疗方法提供较为理想的动物模型。2.自行研制的用药装置可实现食管的局部靶向给药,具有局部药物浓度高,用药量小,全身副作用轻等特点,为临床开展食管癌局部靶向治疗提供了理论依据。3.食管局部灌注DDP对食管粘膜有明显损伤,而化疗前局部给予细胞保护剂—氨磷汀可明显降低化学性食管炎的发生率,为临床应用氨磷汀提供了新的途径。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R735.1;R-332

【参考文献】