戊型肝炎病毒Ch-S-1株全长体外转录载体的构建及表达初步研究

发布时间：2019-02-16 19:43

【摘要】：目的:构建出HEV Ch-S-1株的全长c DNA克隆,并转染至Hep G2细胞并对其表达进行初步研究。方法:利用重叠PCR方法获得HEV Ch-S-1株全长PCR产物;构建体外转录载体p KS-HEV,成功获得HEV基因组RNA,并转染至Hep G2细胞,通过RT-n PCR、套式PCR和间接免疫荧光实验检测病毒的表达。结果:成功构建了HEV基因组全长c DNA体外转录载体p KS-HEV,并证明了该c DNA克隆在Hep G2细胞中成功进行了表达。结论:成功构建了HEV Ch-S-1株全长体外转录载体p KS-HEV,并对其表达进行了初步研究,为将来在分子水平上研究HEV及研发疫苗提供了一些实验基础。
[Abstract]:Aim: to construct a full-length c DNA clone of HEV Ch-S-1 strain and transfect it into Hep G2 cells and study its expression. Methods: the full-length PCR products of HEV Ch-S-1 strain were obtained by overlapping PCR method. HEV genomic RNA, was constructed and transfected into Hep G2 cells by construction of in vitro transcription vector p KS-HEV,. The expression of the virus was detected by RT-n PCR, nested PCR and indirect immunofluorescence assay. Results: the full-length c DNA transcriptional vector p KS-HEV, of HEV genome was successfully constructed and the c DNA clone was successfully expressed in Hep G2 cells. Conclusion: the full-length transcriptional vector p KS-HEV, of HEV Ch-S-1 strain was successfully constructed and its expression was preliminarily studied, which provided some experimental basis for the study of HEV and the development of vaccine at molecular level in the future.
【作者单位】： 长春中药大学附属医院检验科;军事医学科学院军事兽医研究所;
【分类号】：R373.21

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本文编号：2424776