大肠湿热型溃疡性结肠炎大鼠模型的建立及清肠汤对其的影响

发布时间：2019-04-25 19:22

【摘要】： 目的本课题通过建立大肠湿热型UC大鼠模型来研究清肠汤对大肠湿热型UC的影响,深入揭示清肠汤治疗大肠湿热型UC的作用机制,为中医药治疗大肠湿热型UC提供一定的实验基础和理论依据。方法将清洁级健康SD大鼠40只(雌雄各半)按雌雄随机分为5组,分别为A组(正常对照组)、B组(模型组)、C组(SASP组)、D组(清肠汤常规剂量组)和E组(清肠汤大剂量组),每组8只。采用葡聚糖硫酸钠加乙酸配合饮食加环境复合法,复制大鼠大肠湿热型UC模型。造模完成后,对大鼠进行药物灌胃治疗:正常组和模型组均以蒸馏水灌胃;清肠汤常规剂量组和清肠汤大剂量组分别给予不同剂量的清肠汤灌胃治疗;SASP组用SASP混悬液灌胃治疗,以上均给药14d,于第15天禁食不禁水24小时后称重,处死大鼠,迅速剖取结肠,自肛门2 cm处向上取结肠6-8 cm,沿肠系膜纵轴剪开肠腔,在每只大鼠结肠各取二小块(3mm×3mm)结肠组织,一块以4%甲醛固定,石蜡包埋、切片、HE染色,显微镜下观察各组结肠病理改变;免疫组化染色检测结肠组织NF-κB p65和TLR4的表达。另一块组织匀浆,放免法检测细胞因子(TNF-α、IL-1β与IL-6)的含量。结果 1清肠汤对大肠湿热型UC大鼠结肠组织形态学影响结果显示模型组结肠粘膜充血、水肿、弥漫性多发糜烂或溃疡,镜下粘膜固有膜内有弥漫性炎症细胞及中性粒细胞浸润,隐窝有急性炎症细胞浸润等。清肠汤各剂量组和SASP组治疗后,大鼠结肠粘膜轻度充血水肿,未见糜烂、溃疡,镜下粘膜无溃疡,粘膜固有层内有少量淋巴细胞、浆细胞、嗜酸粒细胞浸润,结肠粘膜损伤大体观与模型组比较有明显差异。清肠汤能减轻大肠湿热型UC大鼠结肠组织损伤,促进病变组织修复,治疗大肠湿热型UC有效。 2清肠汤对大肠湿热型UC大鼠结肠粘膜损伤指数(CMDI)的影响结果显示模型组大鼠结肠粘膜明显充血水肿,糜烂出血,溃疡形成,溃疡直径2-6mm不等。治疗后,SASP、清肠汤常规剂量和清肠汤大剂量三组大鼠CMDI(分值)与正常对照组比较无明显差异(P0.05);与模型组比较有显著差异(P0.01);清肠汤大剂量组大鼠结肠粘膜损伤指数与SASP组比较有显著差异(P0.01) 3清肠汤对大肠湿热型UC大鼠结肠组织细胞因子(TNF-α、IL-1与IL-6)表达的影响清肠汤各剂量组和SASP组治疗后与模型组比较,结肠组织TNF-α、IL-1与IL-6含量均下降。说明中药清肠汤具有降低促炎因子TNF-α、IL-1与IL-6表达,调节机体免疫功能,减轻结肠粘膜损害作用。 4清肠汤对大肠湿热型UC大鼠肠组织NF-λB p65和TLR4表达的影响清肠汤各剂量组和SASP组治疗后与模型组比较:大鼠结肠组织NF-κB p65和TLR4表达均下降;清肠汤大剂量组与SASP组比较有显著性差异(P0.01);清肠汤常规剂量组与SASP组比较无显著性差异(P0.05)。说明清肠汤具有降低NF-κB p65和TLR4表达,从而减少细胞因子的分泌,减轻结肠粘膜损害的作用。结论 1通过高糖高脂饮食、高温高湿环境和DSS加乙酸这种复合方法,可以较好地复制出具有大肠湿热证特点的UC大鼠模型。 2中药清肠汤能够改善大肠湿热型UC大鼠的症状,减轻其结肠粘膜的炎性病理改变;在改善大鼠结肠粘膜损伤指数、降低大鼠结肠组织NF-κBp65和TLR4表达和减少细胞因子的分泌方面,中药大剂量组优于SASP组。 3 NF-κB p65、TLR4和细胞因子TNF-α、IL-1与IL-6可能参与了大肠湿热型UC的发生、发展。清肠汤对TLRs/NF-κB通路的多个环节均有干预作用,这可能是其抗大肠湿热型UC作用的部分机理。
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【学位授予单位】：湖北中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R-332;R285.5

【参考文献】