结核分枝杆菌基因突变与耐异烟肼的相关性及其检测

发布时间：2019-05-27 04:05

【摘要】： 目的分析结核分枝杆菌katG、inhA基因突变与耐异烟肼的相关性,并通过核酸薄膜导流杂交技术快速检测基因突变,初步判断有无结核分枝杆菌感染并提示其耐药性。方法对贵州省遵义医学院附属医院呼吸二科结核病区2007年6月至2008年11月期间住院病人进行结核分枝杆菌培养、菌型鉴定及药物敏感性试验,在培养菌落中提取细菌DNA,进行PCR扩增,将所有扩增产物进行DNA序列分析,并将DNA测序结果与药物敏感性试验结果对比；将测序中检测到的与耐异烟肼相关的katG基因315位点的突变形式设计成寡核苷酸探针,并制成载有探针的薄膜,对上述87例标本中存在katG基因315位点突变的18例菌株和15例katG基因野生型菌株共33例进行杂交测试。结果87例菌株经鉴定均为结核分枝杆菌,30(34.5%)例为耐异烟肼菌株,57(65.5%)例为异烟肼敏感菌株；87株结核分枝杆菌菌株中共21株(24.1%)出现katG基因突变,其中18株出现在315位点；24例(27.6%)出现inhA基因突变；8例(9.2%)显示双基因联合突变。30例耐异烟肼株中,18(60%)株出现katG和(或)inhA基因突变,12株未出现此两基因突变；18株中有9(50%)株为katG单基因突变,5(27.8%)株为inhA单基因突变,4(22.2%)株为katG和inhA双基因联合突变。katG基因两个新突变位点(Val230Met和Pro232Gln)为国内外首次发现,已被美国,欧洲和日本的基因库收录。杂交测试的33例菌株均显示有目的基因,与DNA测序结果符合率为93.9%(31／33),与DNA测序相比,其阳性预测值、阴性预测值、敏感度、特异度分别为100%、86.7%、90%、100%。结论结核分枝杆菌katG、inhA基因突变与异烟肼耐药相关,可通过检测基因突变初步判断结核分枝杆菌耐药性,核酸薄膜导流杂交技术检测基因突变高效快速,为结核分枝杆菌耐药性的快速检测奠定了基础。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R378

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 袁瑛;顾德林;顾红艳;;耐多药结核分枝杆菌KatG及rpoB基因变异的研究[J];临床医学;2006年05期

2 李大为,肖春玲;结核杆菌耐药性的分子机制研究进展[J];国外医药(抗生素分册);2003年05期

3 董德琼 ,杨渝浩 ,彭理年,肖瑜;PCR-SSCP技术直接快速检测痰标本中结核分支杆菌rpoB,katG,ahpC基因突变的研究[J];贵州医药;2001年11期

4 予季;熊国亮;张慧慧;刘珍琼;;聚合酶链反应-测序技术快速检测耐异烟肼结核分枝杆菌KatG基因突变的研究[J];江西医学检验;2007年06期

5 吴雪琼,钟敏,张俊仙,俞伟,张军芝,庄玉辉,贾树林;PCR直接测序法分析结核分枝杆菌katG基因突变[J];临床检验杂志;2000年01期

6 李文哲;;反向杂交法检测基因突变的研究进展[J];实用医学杂志;2008年02期

7 吴雪琼;张琼;张俊仙;梁建琴;鲁红丽;李洪敏;张洪恩;陆阳;荣利;吕翠环;张广宇;邢婉丽;;应用基因芯片分析结核分枝杆菌常见耐药基因型的研究[J];中国防痨杂志;2006年01期

8 朱中元,邵寒霜,陈允凤,王海波;结核分支杆菌inhA基因突变的测序研究[J];中华结核和呼吸杂志;2001年01期

9 程晓东,于文彬,别良峰,苏明权,张荣,郝晓柯;多重聚合酶链反应-单链构象多态性分析检测耐异烟肼结核分枝杆菌[J];中华结核和呼吸杂志;2004年01期

10 崔振玲,胡忠义,王洁,张莹蓉,陈慧萍,翁心华;结核分枝杆菌临床分离株异烟肼耐药性四种测定方法的比较[J];中华结核和呼吸杂志;2005年04期

，

本文编号：2485891