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小鼠肠道菌群失衡模型的建立及菌群失衡对肠道机械屏障的影响

发布时间:2019-05-31 09:52
【摘要】: 目的: 1.以肠道十四种优势菌群变化情况为依据,建立轻度菌群失衡和重度菌群失衡小鼠模型。 2.研究肠道菌群失衡对小鼠肠粘膜机械屏障的影响,探讨优势菌群与肠道粘膜屏障的相互作用机制。 方法: 1.采用抗生素头孢曲松钠灌胃的方式建立小鼠肠道菌群失衡模型。以头孢曲松钠终浓度5g/kg/d的剂量,连续8天,取盲肠内容物进行肠道菌群分析,建立小鼠轻度菌群失衡模型;以头孢曲松钠终浓度8g/kg/d的剂量,连续8天,分析肠道菌群,建立小鼠重度菌群失衡模型。 2.利用HE染色及电镜技术观察正常组、轻度菌群失衡组、重度菌群失衡组小鼠肠道粘膜绒毛形态变化,用ELISA法检测肠粘膜分泌性免疫球蛋白SIgA分泌量变化,RT-PCR技术及免疫组化法检测肠粘膜粘液素Mucin2、Mucin3,防御素含量的变化。 结果: 1.头孢曲松钠5g/kg/d,连续8天灌胃,肠道优势菌群显著下降,建立轻度菌群失衡小鼠模型;头孢曲松钠8g/kg/d,连续8天灌胃,肠道优势菌群的数量几乎降至零,建立重度菌群失衡小鼠模型。 2.菌群失衡小鼠肠粘膜绒毛出现肿胀、断裂,绒毛顶端肠上皮细胞坏死、脱落,细胞间间隙增宽,胞浆内出现空泡结构,粘膜及粘膜下层有淋巴细胞浸润,重度菌群失衡与轻度菌群失衡小鼠相比较绒毛结构受损加重。 3.菌群失衡小鼠小肠段肠粘膜分泌性免疫球蛋白SIgA分泌水平下降,重度菌群失衡组与正常组比较下降呈显著变化(P0.05),与轻度菌群失衡组相比下降明显。 4.菌群失衡小鼠粘液层中的粘液素Mucin2、Mucin3、防御素在mRNA水平的表达与正常小鼠相比明显增强,在杯状细胞胞浆内Mucin2蛋白阳性表达增强,且重度菌群失衡组与轻度菌群失衡组小鼠比较,粘液素Mucin2、Mucin3、防御素增强明显。 结论:抗生素干扰肠道优势菌群,建立肠道菌群失衡模型。菌群失衡可导致肠道机械屏障粘膜绒毛结构受损,肠粘膜免疫水平下降,SIgA分泌量随菌群失衡程度呈下降趋势,同时引起粘液层中粘液素和防御素分泌量增加。
[Abstract]:......
【学位授予单位】:大连医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R-332;R574

【共引文献】

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本文编号:2489601

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