大鼠颅底发育中软骨联合细胞凋亡及增殖的研究

发布时间：2019-12-04 04:19

【摘要】： 第一部分大鼠发育中颅底软骨联合组织形态学观察目的研究大鼠发育中不同时期颅底软骨联合的组织学特征。方法选用出生后4d、8d、16d、32d、48d、64d及128d的SD大鼠,取颅底软骨联合组织(蝶骨间软骨联合(Inter-sphenoid synchondrosis,iss)和蝶枕软骨联合(Spheno-occipital synchondrosis,sos)),行HE染色,对软骨联合采用组织学和计量形态学观测。结果软骨联合可分为4区:静止区,增殖区,肥大区,交界区,其细胞具有各自的形态特征。随着鼠龄的增加,软骨联合的总宽度逐渐减小。发育早期(4d-16d),静止区、增殖区细胞层数较多,厚度较大,到了发育中后期(32d-128d),则静止区、增殖区细胞退化,而肥大区软骨细胞生长活跃。蝶枕软骨联合细胞区的量变晚于蝶骨间软骨联合。结论大鼠软骨联合发育由快速增长为主转变成组织改建为主的转折期可能是在32d-48d。蝶枕软骨联合的生长发育和组织改建,持续的时间长于蝶骨间软骨联合,融合时间晚于蝶骨间软骨联合。第二部分大鼠发育中颅底软骨联合细胞增殖和凋亡的研究目的研究大鼠生长发育过程中颅底软骨联合细胞增殖和凋亡现象。方法选用出生后4d、8d、16d、32d、48d、64d及128d的SD大鼠,取颅底软骨联合组织(蝶骨间软骨联合(iss)和蝶枕软骨联合(sos))。行增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色标记增殖细胞,末端脱核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记技术(TUNEL法)标记凋亡细胞,比较观察不同时间软骨联合细胞增殖和凋亡的表达情况。结果在出生后4d、8d及16d的大鼠有大量PCNA阳性细胞存在于软骨联合,而32d、48d、64d及128d的软骨联合区仅有少量阳性细胞,但软骨联合两侧的骨小梁之间阳性细胞较多,蝶骨间和蝶枕软骨联合之间没有显著性差异。在出生后4d、8d、16d的大鼠软骨联合肥大区,交界区发现少数凋亡细胞;而32d、48d及64d的软骨联合的肥大区、交界区和两侧的骨小梁之间有较多散在的黄色荧光凋亡细胞,并随时间推移凋亡细胞逐渐增多;但128d的大鼠几乎未见凋亡细胞。蝶骨间软骨联合和蝶枕软骨联合在16d-64d细胞凋亡有显著性差异(P＜0.05)。结论在大鼠颅底生长发育过程中,存在细胞增殖和凋亡现象并分别与软骨联合增殖区、肥大区的生长变化相一致。细胞凋亡程度的不同是导致两软骨联合生长差异的重要因素。第三部分大鼠发育中颅底软骨联合细胞凋亡信号传导途径的研究目的研究大鼠生长发育过程中颅底细胞凋亡信号传导途径,探讨软骨联合细胞凋亡途径相关信号因子:iNOS,Fas,Caspase-8,9的分布规律。方法选用出生后4d、8d、16d、32d、48d、64d、128d的清洁级健康雄性SD大鼠,取颅底软骨联合组织(蝶骨间软骨联合(iss)和蝶枕软骨联合(sos))。采用免疫组织化学的方法检测大鼠颅底软骨联合细胞iNOS,Fas,Caspase-9,Caspase-8的表达情况,从而推测颅底软骨联合细胞凋亡途径的时空特征,和各途径之间的相关性。结果iNOS,Caspase-9主要在出生后4d、8d、16d的大鼠颅底软骨联合中间静止区、增殖区表达。Fas则主要存在于几乎各个时期的软骨联合各层,但以肥大区,交界区表达为多。Caspase-8也主要在肥大区或交界区表达,但仅出现在发育早期(4d-16d)。蝶骨间软骨联合和蝶枕软骨联合之间没有显著性差异。结论颅底软骨联合存在Fas和NO两种凋亡途径。Fas途径发挥主要作用。NO途径对静止区和增殖区的生长意义更大。
【图文】：

枕软骨,免疫组化染色,高压灭菌

图8蝶枕软骨联合PCNA免疫组化染色(xloo倍)A:阳参片(乳腺癌标本);B:阴参片(一抗换成高压灭菌的磷酸盐缓冲液):C:4d:D:sd;E:16d:F:32d:G:48d:H:64d:I:128d图9蝶枕软骨联合TUNEL法荧光染色(x400倍)A:阳参片(同标本肌肉组织);B:阴参片(把:TdT酶换成高压灭菌的去离子水):C:4d;D:sd;E:16d;F:32d;G:48d;H:64d;I:128d表4大鼠颅底软骨联合的PCNA细胞阳性率(%)和TUNEL阳性细计数(个)

枕软骨,静止区,增殖区,途径

南京医科大学硕士学位论文几乎仅分布在静止区和增殖区。—颅底软骨联合存在Fas和NO凋亡两种途径。FaS途径发挥主要作用。NO途静止区和增殖区的生长意义更大。.尸今‘.，.’.万弋，‘七产.护尹，，.…
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R329

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