人骨髓间充质干细胞体外向心肌样细胞分化及心肌样细胞的特性研究

发布时间：2020-01-31 01:28

【摘要】： 背景：近年来专家学者们开始致力于缺血性心肌病尤其是心肌梗死后心肌细胞的再生和心脏功能的恢复,其中骨髓干细胞移植被公认为是修复损伤心肌纠正心力衰竭的一个有可行性的较有前景的方法。骨髓干细胞具有多向分化潜能使其成为一种非常重要的种子细胞,但多向分化是一把双刃剑,比如其恶性分化为肿瘤细胞等。 目的：探讨体外经化学诱导剂5-氮杂胞苷诱导和模拟的心肌微环境对骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响,并通过细胞移植观察诱导后的心肌样细胞是否适合细胞移植,是否具有移植后的安全性。 材料：取我科冠心病行冠状动脉旁路移植术患者胸骨骨髓和先天性心脏病法洛氏四联症伴有右室流出道肌束肥厚患儿行法四根治术时疏通右室流出道时切除的心肌组织约10g。BALB/C清洁级小鼠12只随机分为经5-aza诱导的心肌样细胞移植组和经心肌细胞裂解液诱导的心肌样细胞移植组,6只/组. 方法：分别取传代至第3代的骨髓问充质干细胞经化学诱导剂5-氮杂胞苷诱导和制取的心肌细胞裂解液模拟的心肌微环境体外诱导21d；将得到的心肌样细胞分别制成3.0×1010/L的单细胞悬液0.3ml分别接种于经5-aza诱导的心肌样细胞移植组和经心肌细胞裂解液诱导的心肌样细胞移植组,3W后留取裸鼠皮下局部组织和心肌组织对比观察。 结果：经5-氮杂胞苷和心肌细胞裂解液模拟的心肌微环境均能够诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化,实验组较对照组之间有统计学差异(P0.05),实验组之间无显著差异(P0.05)。移植心肌样细胞的两组皮下组织检测恶性肿瘤细胞均未发现恶性细胞,两组心肌组织免疫组化测定间质细胞标志Vimentin和心肌特异性标记CX43和Troponin T为阳性。 结论：1.MSCs在合适的条件下具有向心肌样细胞分化的潜能。 2.5-Aza可以在体外诱导MSCs向心肌样细胞分化,而且通过心肌细胞裂解液模拟的心肌微环境和MSCs接触也可以诱导MSCs向心肌样细胞分化,表现出“环境依赖性分化”的特性。 3.MSCs体外分化的心肌样细胞通过移植到裸鼠皮下观察,短期内没有发现成瘤性,并且具有向心脏迁移和归巢的能力。
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R329

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本文编号：2574887