新疆汉族和维吾尔族幽门螺杆菌cagA及vacA基因型分布特征

发布时间：2020-03-02 11:43

【摘要】： 目的:通过本课题的研究,探讨新疆维吾尔族和汉族胃疾病患者感染幽门螺杆菌(Helieobacter pyroli,H.pylori))cagA和vacA基因亚型的分布状况以及与胃相关性疾病的关系。方法:(1)临床收集慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃溃疡和胃癌患者胃镜活检标本,采用H.pylori分离培养技术对其进行H.pylori培养鉴定;(2)采用Chelex 100法提取培养出的H.pylori基因组,采用聚合酶链反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)对H.pylori进行cagA和vacA基因亚型检测,并对其在民族间的分布及与特定疾病间的关系进行分析。结果:检测cagA阳性率为84.8%,其在不同胃疾病的维吾尔族和汉族之间的分布差异无统计学意义(P0.05),在维吾尔族和汉族的不同疾病间cagA阳性率差异也无统计学意义(P0.05)。检测vacA亚型,s1a、s2、m1b、m2阳性率分别为62.0%、4.3%、18.5%、67.4%。在胃癌患者中,vacA m2基因在汉族人群中的阳性率(25%)低于维吾尔族人群中的阳性率(85.7%),vacA m1b基因在汉族人群中的阳性率(75%)高于维吾尔族人群中的阳性率(0%)(P0.05)。在汉族人群中,vacA m2基因在胃溃疡组的阳性率(71.4%)高于胃癌组;vacA m1b在慢性浅表性胃炎组的阳性率(71.4%)高于胃溃疡组(0%)、在胃溃疡组的阳性率低于胃癌组(75%)(P0.05)。结论:新疆地区H.pylori cagA基因与汉族和维吾尔族间及特定疾病间的分布未发现不同;H.pylori vacA m2基因在汉族人群中的阳性率低于维吾尔族人群中的阳性率,vacA m1b基因在汉族人群中的阳性率高于维吾尔族人群中的阳性率;vacA m2基因亚型在胃溃疡组的阳性率高于胃癌组;vacA m1b亚型在胃癌组阳性率较高。
【图文】：

革兰染色,油镜,镜检,所指

图 1 H.pylori 革兰染色油镜（10×100）镜检图（箭头所指为 H.pylori）2.3 H.pylori cagA 和 vacA 基因型的检测2.3.1 H.pylori 基因组 DNA 的提取采用 Chelex 100 法直接从 H.pylori 保存管中提取 H.pylori 基因组 DNA。具体步骤如下所述：1）取出 H.pylori 保存管待融化后 12000rpm 离心 5 分钟，弃上清。2）加入 5% Chelex100 150μl，混匀后再加入蛋白酶 K 4μl，漩涡混匀 10 分钟。3）55℃水浴 3 小时。4）煮沸 10 分钟。5）置于冰上 1 分钟后，12000rpm 离心 10 分钟。6）取上清（约 150μl）置于 1.5ml 的 EP 管中。7）取 5μl 模板与 1μl 6×溴酚蓝载样缓冲液混匀于 0.8%含 EB 的琼脂糖凝胶电泳分离，，紫外凝胶成像系统观察基因组 DNA 条带，未见明显条带。8）取 1μl 模板加入 1ml 1×TE 中，以 1×TE 作为空白，在核酸蛋白分光光度

琼脂糖凝胶电泳,基因,亚型,阳性率

株、维吾尔族 14 株）、慢性萎缩性胃炎携带族 19 株）、胃溃疡（GU）13 株（汉族 7 （汉族 4 株、维吾尔族 7 株）。年龄 18～8性 37 例。和 vacA 基因型结果ylori 中，cagA 阳性率 84.8%（76/92），见表型；vacA s1a 亚型阳性率 62.0%（57/92），表 4；vacA m1b 亚型阳性率 18.5%（17/92）），见表 5。cagA 基因阳性片段大小为 40大小为 190bp（图 3）；vacA s2 亚型阳性片型阳性片段大小为 291bp（图 5）；vacA mM 1 2 3 4 5 6 7
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R378

【参考文献】