四环素调控HSV-tk基因表达及体外杀伤肿瘤细胞的研究

发布时间：2020-03-14 18:54

【摘要】： 单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因是肿瘤基因治疗研究中常用的自杀基因,为达到安全有效的治疗目的,需要调控HSV-tk基因在肿瘤细胞内精确地表达,从而防止基因过表达对机体产生危害,低表达影响治疗效果。 本研究利用基因重组技术构建了四环素调控HSV-tk基因表达的双质粒载体系统,在此基础之上又构建了四环素调控HSV-tk基因表达的单质粒载体系统。体外细胞水平研究结果表明构建的四环素调控HSV-tk的双载体系统可有效调控HSV-tk基因在宫颈癌HeLa细胞表达及抗肿瘤活性;构建的四环素调控HSV-tk的单载体系统可有效地调控HSV-tk基因在HeLa细胞及结肠癌HCT-8细胞内表达,并可调控其抗肿瘤活性. 本研究构建的四环素单质粒基因表达调控系统与四环素双质粒基因表达调控系统比较,具有基因转染操作简便、节省时间和经济成本等优点;同时单质粒调控系统是一个自我调节基因表达的调控载体,能使HSV-tk基因有一定的基础表达,比双载体系统启动基因表达所需时间短、强力霉素所需浓度低,以及调控基因表达时间长。这些特点使其更适用于肿瘤的基因治疗。 本研究成功构建了四环素调控HSV-tk基因表达的双载体系统及单载体系统,为进一步提高HSV-tk基因肿瘤治疗的安全性及有效性奠定了实验基础。
【图文】：

- TetO2酶切产物经 1％琼脂. 未酶切的 pMD18- TetO2质. 酶切的 pMD18- TetO2质粒. Marker I1% agarose gel electrophires products of pMD18- TetO2pMD18- TetO2plasmidpMD18- TetO2plasmid digesDNA Marker I

3 pcDNA3.1-TetO2酶切鉴定产物电泳1. pcDNA3.1 质粒2. pcDNA3.1 质粒酶切产物3 .DNA Marker III4. pcDNA3.1-TetO2质粒5. pcDNA3.1-TetO2质粒酶切产物Fig1.3 1% agarose gel electrophiresis stion products of pcDNA3.1-TetO2plasLane 1．pcDNA3.1 plasmidLane 2．pcDNA3.1 plasmid digestion pLane 3．DNA Marker IIILane 4．pcDNA3.1-TetO2plasmidLane 5．pcDNA3.1-TetO2digestion pro
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R346

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 太光平,汪仕良;目的基因表达调控研究进展[J];国外医学.分子生物学分册;1998年02期

2 滕小军;E-candherin在肿瘤中的表达及其调控机制[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2001年05期

3 李西平,刘志杰;人类珠蛋白基因表达调控机制研究进展[J];国外医学.分子生物学分册;2001年04期

4 成继民,李亚冬,贺占国,陈静;p16与LRP在30例子宫内膜癌中的表达[J];华北国防医药;2002年04期

5 杨钧国;体表心电图表现的分子生物学机制[J];临床心血管病杂志;2003年09期

6 肖秀英,孙孟红;Wnt信号转导通路与肿瘤的研究进展[J];临床与实验病理学杂志;2005年03期

7 韩天权,张圣道;胆囊结石病的遗传特点及家系研究现状[J];外科理论与实践;2005年04期

8 王传生;王庆林;;huGM-CSF研究现状[J];湖南师范大学学报(医学版);2005年04期

9 刘淑毓;郑祥雄;;骨桥蛋白与自身免疫性疾病的关系[J];医学综述;2006年20期

10 范乐明;姜传仓;朱宇;蔡海江;;OX-LDL对THP-1细胞脂蛋白受体基因表达的影响[J];南京医科大学学报(自然科学版);1996年01期

相关会议论文 前10条

1 向华;厉云;周梅先;刘景芳;谭华荣;;极端嗜盐古菌小分子热激蛋白基因表达调控的研究[A];首届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文摘要集[C];2002年

2 秦崇涛;王一铮;吴世代;;“基因表达调控”的教学技巧探索[A];第四届第三次全国中西医结合临床教育会议论文集[C];2011年

3 胡风庆;;四环素调控植物基因表达系统构建进展[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年

4 张雪杨;苏本利;白然;李昌臣;许朝晖;马郁芳;;四环素调控的重组人胰岛素表达载体的构建及体外表达研究[A];中华医学会第六次全国内分泌学术会议论文汇编[C];2001年

5 黄新苗;秦永文;沈茜;吴弘;陈少萍;;hVEGF_(165)四环素调控腺病毒载体的构建及其在成肌细胞的表达[A];中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2004年

6 杨文杰;吴燕民;唐益雄;;大豆转录因子基因GmMYBJ6的表达及功能分析[A];中国遗传学会第八次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编（2004-2008）[C];2008年

7 雷宇;黎燕;王蜀强;陈压西;周智;任红;;乙型肝炎病毒S基因四环素调控体系的构建及其在真核细胞中的表达[A];第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议论文汇编[C];2006年

8 李晓雪;黄百渠;;组蛋白乙酰转移酶P300参与RASSF2A基因表达调控的研究[A];中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会论文摘要集[C];2007年

9 何文喜;牛忠英;赵守亮;;Smads在TGF-β1调控牙本质涎磷蛋白基因表达中作用的研究[A];全面建设小康社会：中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集（下）[C];2003年

10 娄桂予;;葡萄糖对FXR基因启动子的调节[A];第九届西南三省一市生物化学与分子生物学学术交流会论文集[C];2008年

相关重要报纸文章 前10条

1 钟文;我国科学家首次发现对基因表达调控攻克癌症的原理[N];厂长经理日报;2000年

2 李星星 本报记者 房琳琳;李家洋：寻求遗传发育的哲学灵光[N];科技日报;2004年

3 燕民;生物技术在果树上的应用[N];农民日报;2000年

4 本报记者　胡迎新;了解你的两个年龄[N];健康时报;2003年

5 ;生命科学四项课题将获国家高额资助[N];中国高新技术产业导报;2002年

6 中国工程院院士 刘德培本报实习记者谷会京整理;新世纪健康的新理念[N];大众科技报;2009年

7 沈鹰;抗衰老——医学研究新领域[N];经济参考报;2002年

8 本报记者 李海清;抗衰老不只是看着年轻[N];健康时报;2003年

9 国家人类基因组北方研究中心主任 强伯勤;人类基因组研究的突破性进展[N];陕西日报;2000年

10 夏树让;生物技术提升果蔬产业效益[N];中华合作时报;2003年

相关博士学位论文 前10条

1 王茜;四环素调控HSV-tk基因表达及体外杀伤肿瘤细胞的研究[D];吉林大学;2009年

2 马宏;基因工程控制植物育性的基因表达调控和蛋白质工程研究[D];大连理工大学;2001年

3 吕萍;小鼠Lrp5基因表达调控的研究[D];山东大学;2005年

4 王明臣;前列腺癌DNA聚合酶β基因突变、表达及其调控研究[D];郑州大学;2006年

5 姜颖;变形链球菌粘附相关基因表达调控与粘附关系的研究[D];四川大学;2007年

6 付丽红;类风湿性关节炎患者外周血IL-1β、TNF-α、IFN-γ、IL-17、IL-4和IL-10基因甲基化状态研究[D];河北医科大学;2008年

7 闵晓洁;端粒酶活性表达的调控对视网膜新生血管形成影响的实验研究[D];青岛大学;2009年

8 柴立民;从益髓生血颗粒调控β-珠蛋白及相关基因表达探讨肾生髓理论的分子机制[D];中国中医研究院;2005年

9 张翠娟;肝细胞癌抑癌基因甲基化谱制定及其基因表达调节的表基因机制研究[D];山东大学;2005年

10 孙涛;背根节神经元中囊泡转运释放相关基因的差异表达及其在外周神经损伤后可塑性的研究[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2006年

相关硕士学位论文 前10条

1 郭波涛;基因表达调控网络建立的微分方程模型研究[D];第三军医大学;2005年

2 顾红祥;受控凋亡素基因逆转录病毒载体诱导人肝癌细胞凋亡研究[D];暨南大学;2003年

3 杜琰萍;缺氧诱导因子-1a和血管内皮生长因子在食管鳞癌细胞系ECa-109中的表达及其意义[D];南京医科大学;2006年

4 王静;大肠杆菌生物合成中心代谢途径的改造及其对工程菌色氨酸产量的影响[D];河南中医学院;2008年

5 吴金香;hMAM启动子/增强子调控表达载体构建和鉴定及hMAM对乳腺癌细胞增殖及侵袭的影响[D];福建医科大学;2009年

6 段卫明;RbAP46基因转染白血病细胞系的实验研究[D];苏州大学;2003年

7 田健;嗜铁钩端螺旋菌Leptospirillum ferriphilum UBK03抗镍基因的克隆及功能分析[D];中国农业科学院;2006年

8 韩霄松;基于电子细胞图形模型Analog-Cell的基因表达调控的模拟实现[D];吉林大学;2008年

9 姜树原;拟南芥VHA-c基因启动子的结构与功能研究[D];内蒙古农业大学;2006年

10 张彦琦;基因调控网络建立的数学模型研究[D];第三军医大学;2003年

，

本文编号：2587033