载脂蛋白M基因敲除小鼠模型的构建和鉴定

发布时间：2020-07-08 06:52

【摘要】：目的建立载脂蛋白M（apolipoprotein M, apoM）基因敲除小鼠模型及其基因型鉴定方法。 方法采用常规同源重组方法建立apoM基因敲除小鼠模型。分别应用碱基淬灭探针技术及聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction, PCR）-琼脂糖凝胶电泳技术对子代小鼠基因型进行鉴定。 结果在清洁级饲养条件下，apoM基因敲除的杂合子及纯合子小鼠均可以正常生长、繁殖，且在毛色、活动、进食、体温、体重等一般表型方面与野生型小鼠无明显差异。碱基淬灭探针技术鉴定结果显示，野生型小鼠在57.14±0.33C处出现单个熔解谷，敲除型纯合子小鼠在51.33±0.11C处出现单个熔解谷，apoM杂合子小鼠则在两处都出现熔解谷。鉴定结果与PCR-琼脂糖凝胶电泳技术的鉴定结果一致。 结论成功构建了apoM基因敲除小鼠。碱基淬灭探针技术可以准确、经济、方便、快速地分型apoM基因敲除小鼠。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R3416
【图文】：

apoM基因敲除策略图

图 1. apoM 基因敲除策略图注：apoM 基因第 2 外显子至第 5 外显子（E2～E5）被 Lox-Neo-LoxP 所替代，达到敲除该基因的目的。

Southern印迹法筛选apoM基因敲除阳性胚胎干细胞的克隆方案图

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本文编号：2746228